ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
Были выполнены исследования частотных и амплитудных характеристик кальциевых волн, возникающих в ишемизированных участках миокарда в изолированных крысиных сердцах, перфузируемых по методу Лангендорфа. Для визуализации кардиомиоцитов и сосудистой сети перфузию сердец осуществляли раствором с добавлением флуорес-центного красителя Di-8-ANEPPS. Для визуализации кальциевых волн использовали краситель Fluo-4, для окраски митохондрий использовали TMRM. Исследование субэпикардиальных слоев миокарда проводили с помощью лазерного сканирующего конфокального микроскопа, оснащённого резонансным сканером. Для проведения спектрального ана-лиза был выбран участок миокарда размером 400х400 мкм, в котором производилась регистрация флуоресцентных сигналов в течение 110 сек с временным разрешением 17 кадров/сек. Спектральный анализ кальциевых осцилляций проводили с помощью быстрого преобразования Фурье и коррелограммно-периодогрaммного метода Уэлча. Построены графики зависимости амплитуды и частоты двух первых гармоник кальциевых осцилляций от расстояния до очага повреждения. Обнаружено, что кардиомиоциты, расположенные в зоне ишемического повреждения миокарда, характеризуются повышенным содержанием ионов Ca2+, сниженным митохондриальным потенциалом и сократительной ак-тивностью. В этих клетках по мере увеличения концентрации Ca2+ сперва увеличивается амплитуда нормальных колебаний концентрации ионизированного Ca2+, а затем возникают автономные высокочастотные кальциевые осцилляции, которые могут быть вовлечены в формирование аритмий и способствовать развитию сократительной дисфункции при заболеваниях сердца. Затухающие колебания концентрации Ca2+ были обнаружены в кардиомиоцитах, находящихся в состоянии гиперсокращения. Исследование выполнено при финансовой поддержке Российского научного фонда (проект 15-15-20008).