ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
Современную медицину невозможно представить себе без антибактериальных препаратов. Одной из активно используемых групп соединений этого класса являются фторхинолоны. Они широко применяются в медицине, в том числе и в ветеринарии, в которой используются не только для лечения, но и для профилактики болезней животных. Бесконтрольное применение фторхинолонов ведёт к появлению новых устойчивых штаммов микроорганизмов, а так же к контаминации пищи, что может повлечь за собой возникновение различных негативных для здоровья последствий. Техническим регламентом таможенного союза установлены строгие нормы на содержание в пище животного происхождения фторхинолонов. Так, например, их содержание не может превышать 100 мкг/кг в мясе [2] и 100 мкг/л в молоке [1]. Стандартным методом для определения фторхинолонов является ВЭЖХ. Несмотря на высокие точность и чувствительность, отработанность методик, этот метод обладает такими недостатками, как сложность и дороговизна оборудования, большое время анализа, необходимость подготовки персонала. Поэтому предварительно, перед проведением анализа методом ВЭЖХ, используют скриннинговые методы анализа, гораздо более производительные. Одним из таких методов является Поляризацонный флуоресцентный иммуноанализ (ПФИА). Он обладает такими достоинствами как высокая чувствительность, селективность, производительность и экспрессность. В качестве стандартной флуоресцентной метки в ПФИА используется флуоресцеин и его производные. В данной работе предлагается заменить флуоресцеин на квантовые точки, обладающие такими преимуществами перед флуоресцеином как высокая фотостабильность, широкий спектр поглощения и узкий пик флуоресценции, а также высокий квантовый выход. Такая замена, в теории, должна обеспечить увеличение чувствительности, что так же означает уменьшение расхода реагентов. *** В ходе работы была показана применимость квантовых точек в качестве флуоресцентных меток в ПФИА, а так же возможность определения низкомолекулярных аналитов в такой системе. Была разработана методика синтеза конъюгата квантовых точек, стабилизированных тиопропионовой кислотой, с пазуфлоксацином (Qd-PAZ). Были построены калибровочные кривые для модельной системы и определён диапазон определяемых концентраций ципрофлоксацина, который составил 300-1000 нг/мл в системе Qd-PAZ–AntiCIP-113. Была разработана методика определения ципрофлоксацина методом ПФИА с использованием квантовых точек в качестве флуоресцентных меток.