ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
Изучение взаимодействия компонентов фотосинтетической электрон-транспортной цепи, в частности фотосистемы 1 (ФС1), с О2 в условиях воздействия высоких интенсивностей света требует присутствия эффективного донора электронов. Тогда реакция ФС1 с акцептором электронов окажется скорость-лимитирующей стадией. Кроме того, в среде не должно протекать побочных реакций с участием О2. В данной работе мы детально изучили взаимодействие двух наиболее часто используемых донорных донорных пар аскорбат + дихлорфенолиндофенол (ДХФИФ) и аскорбат + N,N,N’,N’-тетраметил-1,4-p-фенилендиамин (ТМФД) с ФС1 и О2. Нами были использованы выделенные комплексы ФС1 из цианобактерии Synechocystis sp. PCC 6803. Их взаимодействие с донорными парами мы изучали методами измерения скорости поглощения О2 с помощью стандартного электрода Кларка и методом регистрации сигнала Р700+ с помощью PAM-флуориметра. Мы сравнили скорости поглощения О2 в суспензии без добавок и в присутствии метилвиологена, который эффективно принимает электроны от ФС1 и затем восстанавливает О2. Эффективность работы ДХФИФ и ТМФД как доноров электронов определялась путем сравнения скоростей поглощения О2 в присутствии метилвиологена. Нами было показано, что в случае использования ДХФИФ в качестве медиатора, скорости поглощения О2 были значительно более высокими, чем при тех же концентрациях ТМФД. Таким образом, в условиях стационарного освещения ДХФИФ является более эффективным донором электронов. Это также подтверждают измерения кинетики восстановления Р700+: в присутствии ДХФИФ скорость восстановления Р700+ выше, чем в присутствии ТМФД. С другой стороны, нами было выявлено, что скорость поглощения О2 в пробе, содержащей ДХФИФ, линейно растет с увеличением его концентрации, в то время как в случае ТМФД этот показатель выходит на плато уже при относительно низких концентрациях медиатора. Мы предположили, что это связано с тем, что ДХФИФ выступает также в роли акцептора электронов. Это подтверждается результатами измерений зависимости амплитуды сигнала Р700+ от концентрации ДХФИФ и ТМФД. Таким образом, несмотря на то, что ДХФИФ является более эффективным донором, он может подобно метилвиологену акцептировать электроны от ФС1 и восстанавливать О2. Поэтому в его присутствии изучение реакции взаимодействия О2 с ФС1 затруднительно и этот фактор необходимо учитывать при проведении подобных экспериментов.