ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
Для того чтобы изучить, оказывают ли полисахарид-полифенольные комплексы грибов непосредственное воздействие на рост опухолевых клеток и их метаболизм, был применен анализ экспрессии генов, вовлеченных в иммунные ответы и регуляцию апоптоза, в опухолевых клетках линии К562. Изучали экспрессию шести генов - Bcl-2, Casp-9, NF-κB, TNFα, IFNγ и IL-10 – в клетках, обработанных спиртовыми экстрактами A.bisporus и P.linteus. Оценку индукции синтеза цитокинов по уровню мРНК проводили в обратнотранскриптазной полимеразной цепной реакции (RT-PCR). Целью данной работы было подобрать гены, наиболее подходящие для оценки стимулирования синтеза цитокинов под действием грибных экстрактов, условия проведения реакций, референтный ген со стабильной экспрессией, а также методику оценки результатов. Были отмечены значительные отличия в уровне регуляции транскрипции генов под действием спиртовых экстрактов двух изученных грибов. Спиртовые экстракты P.linteus отличались наивысшей активностью и вызывали про-апоптотические эффекты в клетках К562: экспрессия гена Bcl-2 возрастала в 4.5 раза, а гена каспазы-9 (Casp9) - в 2.1 раза. Была отмечена значительная активация экспрессии про-апоптотичнских генов (Casp9, NF-кB, TNFα) в опухолевых клетках К562, обработанных экстрактами A.bisporus. Был отмечен также дозозависимый эффект в регуляции изучаемых генов.