ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
Данные литературы свидетельствуют о том, что различные посттрансляционные модификации могут влиять на структуру, свойства и шапероноподобную активность малых белков теплового шока (small heat shock proteins, HspB). Однако в литературе практически нет сведений об эффектах одной посттрансляционной модификации (или точечного мутирования) на другую. В нашей работе мы исследовали влияние точечных мутаций N-концевого домена и модификации метилглиоксалем (МГО) на фосфорилирование HspB1 и HspB6, соответственно. Установлено, что точечные мутанты N-концевого домена HspB1 (G34R, P39L, E41K), экспрессия которых коррелирует с развитием врожденной нейропатии, фосфорилируются МАРКАР2 киназой (mitogen-activated protein kinase-activated protein kinase 2) со скоростью и эффективностью, сопоставимой с таковой для белка дикого типа. Фосфорилирование HspB1 дикого типа сопровождается полной диссоциацией крупных олигомеров, в то время как анализируемые мутанты, содержащие такое же количество остатков фосфата как и белок дикого типа, практически не диссоциируют. Считается, что обратимая диссоциация/ассоциация мономеров играет важную роль в нормальном функционировании HspB1. Поэтому точечные мутации в N-концевом домене, предотвращающие вызванную фосфорилированием диссоциацию олигомеров, могут влиять на функционирование HspB1 и быть одной из причин, ведущих к возникновению врожденных патологий. Нарушение обмена углеводов сопровождается накоплением дикарбонильного производного - метилглиоксаля. Мы обнаружили, что МГО даже в низкой концентрации эффективно модифицирует Arg13, Arg14 и Arg27 малого белка теплового шока HspB6. Указанная модификация не сопровождается значительными изменениями олигомерного состояния, но заметно ингибирует фосфорилирование HspB6 под действием сАМР-зависимой протеинкиназы. Многие физиологически активные свойства HspB6 зависят от уровня его фосфорилирования, поэтому модификация МГО (или неэнзиматическое гликирование) могут оказывать существенное влияние на эффективность функционирования HspB6 в клетке. Дальнейшее изучение фосфорилирования малых белков теплового шока может позволить выяснить молекулярные механизмы развития некоторых патологий. Работа была поддержана грантами РФФИ 16-04-00016 и РНФ 14-35-00026