ИСТИНА

Для оценки активности фотосистемы 2 (ФС2) традиционно используют кривые индукции флуоресценции, так называемые OJIP-кривые. Кинетика флуоресценции хлорофилла а представляет собой многофазную кривую. Фазы кривой принято соотносить со стадиями переноса электрона в ФС2. Начальный участок кривой, так называемую К-фазу, принято соотносить с состоянием кислород-выделяющего комплекса (КВК), находящегося на донорной стороне ФС2. Для визуализации К-фазы часто используют метод сравнения индукционных кривых, основанный на вычитании контрольной кривой из кривых, записанных в различных условиях. Считается, что появление K-фазы (максимум на кривой разности примерно при 300 мкс) указывает на инактивацию КВК в соответствующем образце. Такой подход обычно используется только для качественной оценки инактивации КВК. Нами была выдвинута гипотеза о том, что изменение величины максимума К-фазы (названного нами Δmax) может указывать на долю фотосистем с инактивированным КВК. Подтверждение этой гипотезы позволило бы дать количественную оценку степени инактивации КВК. Для проверки выдвинутой гипотезы мы провели эксперимент по оценке степени инактивации КВК при нагревании препаратов выделенной из шпината фотосистемы 2 и суспензии клеток водоросли Chlorella. Образцы сначала подвергались нагреванию до определенной температуры в диапазоне от 25°С до 50°С, далее охлаждались до 4°С, и затем при 25°С проводилось измерение скорости выделения кислорода. Параллельно регистрировались кривые индукции флуоресценции. Были получены температурные зависимости для скорости выделения кислорода (VO2) и для параметра Δmax, рассчитанного по индукционным кривым. Коэффициент корреляции между температурными кривыми для VO2 и Δmax, измеренными на образцах ФС2 составил 0.99, тогда как для клеток Chlorella – 0.95. Высокая степень корреляции между кривыми позволяет предложить параметр Δmax для количественной характеристики степени инактивации КВК. Работа выполнена при частичной поддержке РФФИ, проект №17-04-00676.