ИСТИНА

Ядерная ламина (ЯЛ), белковая оболочка, подстилающая внутреннюю мембрану ядра, не только защищает геном от повреждения и обеспечивает селективный транспорт молекул, но и за счет своих вязкоупругих свойств участвует в процессе миграции клеток и способствует их устойчивости к механическому напряжению. Данные механические свойства ЯЛ обеспечиваются ее структурными компонентами ламинами А- и B-типа. Известно, что нарушение функции ламинов А-типа приводит к развитию целой группы патологий (ламинопатий), одним из механизмов развития которых рассматривают дестабилизацию ядерной оболочки (ЯО) и повреждение генома. Кроме того, нарушение экспрессии генов ламинов сопровождает онкогенез. Причем как низкий, так и высокий уровни ламина А могут быть плохим прогностическим признаком. До сих пор остаются дискуссионными вопросы о патогенезе ламинопатий и онкологических заболеваний, составом ядерной ламины и механическими свойствами ЯО. В данной работе мы рассмотрели взаимосвязь молекулярного состава ЯЛ и механических свойств ЯО в норме и при патологиях, а также провели оценку миграции таких клеток. Оценка механической устойчивости мышечных клеток и производных линий (синтезирующие мутантные формы R249Q, G465D, R471C, R482L, R527C и R527P) была проведена в гипоосмотических условиях. Анализ результатов показал нарушение механических свойств ядра в присутствии мутаций, расширение расстояний между микродоменами ЯЛ и формирование агрегатов в составе сети. Изменения вязкоупругости ядра и подвижности опухолевых клеток HT1080 через узкие пространства при введении генетических конструкций, содержащих ген нормального ламина А, прогерина и shRNA, подавляющей синтез данной изоформы, были измерены с помощью сканирующего ион-проводящего микроскопа и миграционных системах, соответственно. Анализ полученных данных показал повышение жесткости ЯО в клетках, синтезирующих экзогенные ламин А/прогерин, и снижение эффективности миграции через фильтры с размером пор 3 мкм. Работа выполнена при поддержке Российского Научного Фонда (проект №17-15-01290) и Программы развития МГУ (ПНР 5.13).