![]() |
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
Определение антимикробной активности (АМА) лекарственных веществ (ЛВ) всегда актуально. Порядок испытаний в целом отработан. Методы: in vitro - на микроорганизмах (МО), in vivo - биологический метод, на лабораторных животных, на добровольцах. Разработка новых методов, их усовершенствование остается необходимым. Требования к методам определения АМА: чувствительность, быстрота и простора, доступность и дешевизна. Среди методов in vitro известны: (I) диско-дифузионный (аппликационный), (II) таблеточно-дифузионный, (III) луночно-дифузионный, (IV) серийные разведения ЛП, (V) кинетический или метод «острых опытов», (VI) люминесцентный (фотонный), (VII) микроскопический, (VIII) проточно цитометрический. Все методы популяционные, имеют достоинства, недостатки и ограничения. Наиболее распространенные методы: I - III. Их достоинства и преимущества - доступность, краткосрочность, наглядность, дешевизна, незаменимы при использовании гелей, деградируемых “губок”, пленок. Недостатки - условная размерность (в мм); необходимость статистической оценки достоверности; зависимость от условий эксперимента. Ограничения - применимы только для растворимых ЛВ, хорошо диффундирующих в затвердителе используемой среды. Достоинства метода V – количественная размерность (для метода IV - только МИК!), содержательность, сравнимость. Недостатки – бóльшая трудоемкость. Особенности методов IV - VIII – применимы только для растворимых ЛВ, рост МО только в жидкой среде. Метод VI - в основном для выявления возможной токсичности ЛВ. Метод VII - более индивидуальный, организменный. Метод VIII – дорогой, требующий квалифицированного оператора. Методы различны в их чувствительности, в глубине вскрытия механизмов действия ЛВ на ОМ. Метод V выявляет Ki, «узкие места» в метаболизме МО, метод IIV - целостность МО. Мол. биологические. методы в их современном состоянии для массовых испытаний – мало приемлемы. Автоматизация микробиологической диагностики: только на уровне применение планшетов. Возможное будущее: чипы (микро), проточно цитометрический. Перспективы развития методов диагностики: целевая модификация методов диагностики для испытуемого продукта, генетико-метаболическое конструирование ОМ с целевыми мишенями для испытания, модифицированного или ново сконструированного продукта.