ИСТИНА

Количественная оценка фагоцитарной активности (ФА) макрофагов является важной задачей для клинических и эксперименталь- ных исследований. В представленной работе проведён сравнительной анализ ФА провоспалительных (М1) макрофагов человека методами лазерной сканирующей конфокальной микроскопии (ЛСКМ) и проточной цитометрии с визуализацией (IFC AMNIS). Для оценки ФА клеток использовали показатели фагоцитарного индекса (ФИ) и фагоцитарного числа (ФЧ). Результаты показали, что значения ФИ, полученные двумя методами, сопоставимы. Выявлено, что опсонизация объектов фагоцитоза повышает ФИ на всех сроках дифференцировки М1 макрофагов, а при формировании зрелого фенотипа регистрируется преобладание фагоцитоза через Fc рецеп- торы. При анализе методом ЛСКМ оценка ФЧ проводилась путем выделения групп с низким (<10 частиц), средним (11–20) и высоким (>20 частиц) значениями, а для IFC AMNIS использовали параметр интенсивности флуоресценции частиц. Оба метода продемонстрировали схожую динамику распределения макрофагов по группам. Для нерецепторного фагоцитоза характерно преобладание клеток с низкими значениями ФЧ на всех сроках эксперимента, а для рецепторного фагоцитоза — возрастание доли клеток с высокими значениями ФЧ. Метод ЛСКМ позволяет: оценить ФИ и ФЧ по- средством визуализации каждой частицы в клетке, выявить зоны их локализации, кластеризацию частиц и проанализировать морфоло- гические типы клеток. Однако при этом увеличиваются временные затраты на обработку получаемых изображений. Метод IFC AMNIS предполагает быстрый анализ ФИ, но для оценки ФЧ необходимо применение такого параметра, как интенсивность флуоресценции. Ключевым преимуществом IFC AMNIS является высокая произво- дительность (большая выборка) и быстрота анализа, что особенно актуально в клинической практике при работе с большим количе- ством образцов.