ИСТИНА

Сферические бислойные везикулы (липосомы) нашли широкое применение в медицине и биологии в качестве носителей биологически активных веществ. Несмотря на достигнутые успехи, многие социально значимые болезни демонстрируют высокую сопротивляемость действию традиционных, в том числе липосомальных лекарств, что требует проведения комбинированной терапии с участием нескольких лекарств в дозировках, подобранных для конкретного пациента. Возможное решение этой проблемы заключается в формировании мультилипосомального контейнера (МЛК), состоящего из нескольких типов липосом, каждый из которых заполнен определеннным лекарством. Однако следует иметь в виду, что после попадания в биологическую жидкость МЛК будет вступать во взаимодействие с растворенными в ней многозарядными компонентами, прежде всего с белками, что может привести к его дестабилизации. Открытым остается вопрос и о механизме взаимодействия МЛК с биологической мембраной. В данной работе МЛК были получены связыванием анионных липосом с мольным содержанием анионного липида ν = 0.3 и сферических поликатионных щеток (СК+). Было показано, что при ионной силе физиологического раствора полученные комплексы устойчивы к диссоциации на исходные компоненты и несут отрицательный заряд. Также был установлен состав насыщенных МЛК: количество предельно адорбированных липосом на поверхности одной СК+ равнялось __. При попадании МЛК в среду, содержащую альбумин (БСА) наблюдалась адсорбция белка на поверхность СК+. При этом не происходило вытеснения липосом с поверхности щеток. Цитотоксичность СК+, а также их комплексов с БСА и липосомами исследовали по стандартной методике, используя МТТ-тест, на основании которого получали зависимость доли выживших клеток от концентрации добавленного субстрата концентрации, при которых они убивали 50% клеток (IС50). Было обнаружено, что для исходных щеток значения IС50 составляют 106 мкМ. В то же время для тройных комплексов значения IС50 не были достигнуты во всем исследованном диапазоне концентраций реагентов. Далее была оценена эффективность действия противоопухолевого антибиотика - цисплатина. Для индивидуального лекарства цитотоксичность (IC50) составила 29 мкг/мл. Инкапсулирование цисплатина в липосомы привело к снижению концентрации IC50 антибиотика до 200 мкг/мл. В то же время для собранных в составе тройных комплексов липосом, загруженных цисплатином цитотоксичность в пересчёте на концентрацию антибиотика составила 2.8 мкг/мл. Таким образом, мультилипосомальные комплексы способны обеспечить повышенную эффективность действия антибиотка. Методами флуоресцентной микроскопии, а также при помощи оптического пинцета было продемонстрировано, что несмотря на эффективный отрицательный заряд тройные комплексы способны взаимодействовать с отрицательно заряженными модельными клеточными мембранами, при этом не наблюдается вытеснения липосом из комплекса при адсорбции, а целостность наноконтейнера не нарушается. Полученные результаты представляют интерес для понимания поведения мультилипосомальных носителей лекарственных веществ в биологическом окружении и, в частности, для прогнозирования их взаимодействия с клетками.