ИСТИНА

Bgl2 одна из основных мажорных глюканозилтрансгликозилаз клеточной стенки (КС) дрожжей ответственна за правильное формирование её структуры и динамичные изменения в процессе роста их клеток и ответе на стресс. Глюканозилтрансгликозилазы в КС находятся в тесном контакте со своим субстратом-глюканом на границе дрожжевой клетки и нестабильной внешней среды. До сих пор неясно, каков механизм регуляции функционирования глюканозилтрансгликозилаз в целом и Bgl2 в частности, в то же время их бесконтрольная активность опасна для клеток. Мы предположили, что наиболее привлекательным объяснением может быть механизм с участием посттрансляционных модификаций. Например, фосфорилирование, вследствие которого может приводить изменение конформации глюканозилтрансгликозилазы Bgl2, включая область её активного центра. Данных о фосфорилировании молекулы Bgl2 в литературе представлено мало. В процессе работы были получены данные о наличии трёх пулов Bgl2: молекул без фосфорилирования (Bgl2P-), молекул с фосфорилированием по Thr84 (Bgl2P) и с множественным фосфорилированием (Bgl2Pn, где n от 2 до 11). Молекулы последнего могут содержать различные комбинации фосфорилированных аминокислотных остатков. Выдвинута гипотеза, согласно которой Bgl2P- и Bgl2P, в отличие от вариантов молекул с множественным фосфорилированием Bgl2Pn, сохраняет структуру активного центра и стабильность, при этом единичное фосфорилирование способствует стабильности белка. Для проверки были получены расчёты траекторий методом молекулярной динамики. При сравнительном анализе значений радиусов гирации и RMSD (англ. Root Mean Square Deviation) были установлены отличия в стабильности Bgl2Pn от Bgl2P- и Bgl2P. В ходе моделирования некоторые варианты Bgl2Pn, в отличие от Bgl2P- и Bgl2P, значительно изменяли свою конформацию, теряли симметрию, демонстрировали устойчиво высокое значение RMSF (англ. Root Mean Square Fluctuation), область их активного центра деформировалась. Результаты моделирования подтверждают высказанную гипотезу. Обсуждаются принципиальные различия во внутримолекулярной подвижности и динамике конформационных переходов глюканозилтрансгликозилазы Bgl2 с различной степенью фосфорилирования. Работа поддержана грантом РФФИ 20-04-01144 А.