ИСТИНА

Полиэлектролитные мультислойные капсулы (ПМК) из биодеградируемого комплекса полиэлек- тролитов продемонстрировали свою эффективность для доставки препаратов в раковые клетки in vitro [1,2]. Для повышения противоопухолевой активности перспективным подходом является мо- дификация поверхности субмикрокапсул с помощью мутантного варианта цитокина TRAIL DR5-B, селективно связывающегося с рецептором смерти DR5 и запускающего апоптоз раковых клеток [3]. В настоящей работе изучена активность TRAIL DR5-B-модифицированных субмикрокапсул на TRAIL-чувствительной клеточной линии колоректальной карциномы человека НСТ116 с помощью МТТ-теста в 2D (монослойная культура) и 3D (опухолевые сфероиды) моделях in vitro. ПМК получали методом послойной адсорбции сульфата декстрана (DS) и поли-L-аргинина (Parg) на поверхности частиц ватерита диаметром 500 нм (ПМК500). После нанесения трех бислоев (Parg/DS)3 частицы ватерита растворяли этилендиаминтетрауксусной кислотой. Термическая обра- ботка капсул при 90°С позволила уменьшить средний диаметр ПМК до 300 нм (ПМК300). Для моди- фикации поверхности капсул молекулами цитокина ПМК500 и ПМК300 инкубировали c TRAIL DR5- B, об успешности электростатического связывания молекул с поверхностью субмикрокапсул судили по изменению знака дзета-потенциала поверхности, содержание DR5-B в капсулах определяли спек- трофотометрически. Показано, что ПМК@TRAIL DR5-B накапливаются в клетках НСТ116 быстрее, чем свободный TRAIL DR5-B. Через 24 ч инкубации с клетками НСТ116 IC50 для ПМК500@TRAIL DR5-B в 2D и 3D моделях были равны 539 и 816 нг/мл, а IC50 для ПМК300@TRAIL DR5-B в 2D и 3D моделях составили 836 и 1429 нг/мл, соответственно. После 48 ч значения IC50 для ПМК500@TRAIL DR5-B в 2D и 3D моделях были равны 303 и 7 нг/мл, соответственно. В то время как IC50 ПМК300@TRAIL DR5-B в 2D и 3D моделях составили 97 и 2 нг/мл, соответственно. Обнаружено, что клетки в 3D модели к 48 ч становятся более чувствительными в особенности к ПМК300@TRAIL DR5-B, чем в 2D модели. Таким образом, ПМК300@TRAIL DR5-B показали более высокий противо- опухолевый эффект, далее они были загружены доксорубицином (DOX) для его активной адресной доставки. Проведено сравнение эффекта от ПМК300@TRAIL DR5-B и DOX-ПМК300@TRAIL DR5-B на клетках НСТ116. Оптимизация термической обработки капсул и их загрузка доксорубицином выполнены при под- держке гранта Президента РФ МК-1109.2021.1.3. Литература [1] Trushina D. B. et al. Doxorubicin-loaded biodegradable capsules: Temperature induced shrinking and study of cytotoxicity in vitro //Journal of Molecular Liquids. – 2019. – Т. 284. – С. 215-224. [2] Ermakov A. V. et al. In Vitro Bioeffects of Polyelectrolyte Multilayer Microcapsules Post-Loaded with Water-Soluble Cationic Photosensitizer // Pharmaceutics. – 2020. – 12. -7. 610. [3] Gasparian M. E. et al. Mutations enhancing selectivity of antitumor cytokine TRAIL to DR5 receptor increase its cytotoxicity against tumor cells //Biochemistry (Moscow). – 2015. – Т. 80. – №. 8. – С. 1080-1091.