ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
Развитие метода фотодинамической терапии сопряжено с поиском и направленным синтезом новых фотосенсибилизаторов (ФС), а также с разработкой методов оценки их эффективности. Использованная в данной работе оригинальная методика оценки эффективности ФС основана на измерении разности граничных потенциалов b бислойной липидной мембраны (БЛМ), являющейся моделью клеточной мембраны. Изменение граничного потенциала мембраны при адсорбции порфиринов было измерено с помощью двух методов: метода компенсации внутримембранного поля (КВП) и по изменению проводимости БЛМ, индуцированной нонактином. Полученные значения b сравнивались со значениями -потенциала липосом с адсорбированными на них молекулами ФС. С помощью такой методики были изучены адсорбция и фотодинамическая эффективность катионных порфиринов c фосфором (V), различающихся числом периферийных пиридиновых заместителей и структурой аксиального лиганда: гидроксильный (OH) или этиловый (OEt).Изменение b на БЛМ не регистрировалось в случае порфиринов, не имеющих периферийных пиридиновых групп. Сравнение значений b, измеренных методами КВП и с нонактином, позволило установить, что порфирины, имеющие аксиальные лиганды ОН, проникают сквозь мембрану, в отличие от порфиринов с этиловыми лигандами. Значения b значительно превышали -потенциалы, откуда сделан вывод, что заряженные группы молекул порфиринов при адсорбции погружаются в мембрану, то есть эти молекулы встраиваются в БЛМ.Фотодинамическая активность порфиринов изучалась с помощью измерения скорости разрушения встроенных в мембрану молекул-мишеней синглетного кислорода - стириловых красителей di-4-ANEPPS в присутствии ФС методом КВП [1]. Скорость разрушения определялась по кинетике изменения b при освещении мембраны с адсорбированными на ней молекулами порфиринов и di-4-ANEPPS. Исследование осложнялось из-за саморазрушения ФС в мембране. Данный процесс контролировался по изменению b, вызванного их адсорбцией, при освещении БЛМ. Разрушение мишеней регистрировалось в присутствии всех порфиринов, включая и те, которые не имели боковые пиридиновые заместители. Данный факт свидетельствует о том, что порфирины без пиридиновых заместителей способны адсорбироваться на мембране, хотя при этом не происходит изменения b. Порфирины с этиловой аксиальной группой обладали большей фотодинамической активностью, чем порфирины с гидроксильной группой, что объяснено погружением ФС с этиловой группой в мембрану на большую глубину.