ИСТИНА

Гидрофильная хроматография — современный метод, который сочетает в себе характеристики трех главных методов жидкостной хроматографии: применение неподвижных фаз, используемых в нормально-фазовой ВЭЖХ, подвижных фаз, характерных для обращенно-фазовой ВЭЖХ, возможность определения заряженных соединений, аналогично ионной хроматографии. Высокая селективность и эффективность достигаются за счет использования полярных сорбентов с разнообразными по строению и природе функциональными группами. Основными задачами в этой области являются изучение механизма удерживания, а также синтез и изучение новых сорбентов, так как на данный момент на рынке по- прежнему существует постоянный спрос на новые фазы, которые обладают другими свойствами. Необходимо отметить, что для синтеза новых сорбентов немалую роль играет высокий выход реакции модифицирования, хорошая воспроизводимость и доступность реагентов. Таким требованиям удовлетворяет четырехкомпонентная реакция Уги. Более того, использование мультикомпонентных реакций для синтеза сорбентов открывает возможность включения различных полярных групп на поверхности матрицы и их легкое варьирование. Одной из ключевых стадий реакции является образование основания Шиффа при взаимодействии аминогрупп с карбонильным соединением: кетоном или альдегидом. Разнообразие карбонильных соединений включает реакционноспособные, стерически не затрудненные кетоны или альдегиды либо более пространственно-затрудненные соединения с дополнительными функциональными группами, использование которых также может привести к созданию сорбентов с повышенной селективностью и эффективностью. В работе для получения новых гидрофильных сорбентов применяли реакцию Уги с использованием гликолевой кислоты, 2-морфолиноэтилизоцианида и различных карбонильных соединений. В качества амина при этом выступала матрица – аминопропилсиликагель (диаметр частиц 5 мкм). Для увеличения гидрофильности неподвижных фаз были выбраны карбонильные соединения с низкими коэффициентами липофильности, такие как ацетон (logP = –0.24), 2-ацетилфуран (logP = 0,80), 2- ацетилпиррол (logP = 0.56) и ацетальдегид (logP = –0.17). Оценку и сравнение хроматографических характеристик синтезированных сорбентов проводили с использованием теста Танака для гидрофильных фаз и модельных смесей полярных аналитов: сахаров, водорастворимых витаминов, органических кислот, аминокислот, азотистых оснований и нуклеозидов. Использование 2-ацетилпиррола для синтеза сорбента привело к увеличению гидрофильности его функционального слоя согласно фактору удерживанию уридина в тесте Танака (kU = 3.82) по сравнению с использованием других трех карбонильных соединений. Это позволило улучшить характеристики разделения: эффективность при разделении смеси 11 азотистых оснований и нуклеозидов увеличилась в среднем в 1.5 раза по сравнению с неподвижными фазами, полученными с использованием других карбонильных соединений (изократическое элюирование, подвижная фаза состава 10/90 об.% 20 мМ ацетатно-аммонийный буферный раствор pH 4.7/ацетонитирил, скорость потока 1 мл/мин, спектрофотометрическое детектирование при длине волны λп = 254 нм, время разделения 12 минут). Также на всех полученных сорбентах возможно разделить смесь 9 сахаров за 25 минут с эффективностью до 25000 тт/м.