ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
С каждым годом растет число устойчивых к антибиотикам микроорганизмов. В 2019 году число смертей от болезней, вызванных резистентными к современным лекарствам бактериями по планете превысило миллион [1]. Поэтому важно находить новые вещества, способные ингибировать рост микроорганизмов. Репортерные системы упрощают поиск веществ с антибактриальной активностью. Для упрощения использования данных систем возникла необходимость в подборе условий об- работки репортерного штамма с целью длительного хранения или транспортировки. Для работы использовался штамм с плазмидой pDualRep2, позволяющий по флуоресценции определить тип стресса, которому подвергается бактерия - повреждение ДНК, вызываю- щее SOS-ответ, или остановка рибосомы, активирующая триптофановый оперон [3]. В качестве отправной точки были выбраны 5 вариантов растворов для сушки и 3 варианта предвартиельной заморозки [2]. С лучшим из них был поставлен длительный опыт хране- ния (2,5 месяца) при охлаждении до +4*C и при комнатной температуре, показавший, что в таких условиях штамм выживает в достаточных количествах для образования газона на чашке с агаризованной средой и сохраняет репорные свойства. Для осуществления теста с таким штаммом не требуется дополнительной подготовки и достаточно просто растворить его в жидкой питательной среде. В дальнейшем возможно также использовать методику для репортеров, чью активность можно детектировать невооруженным глазом, что открывает возможности для массового поиска новых потенциальных антибиотиков добровольцами. Автор выражает благодарность Остерману И. А. и Лукьянову Д. А. за руководство и по- мощь в обучении. Данное исследование было профинансировано Министерством науки и высшего образова- ния Российской Федерации (соглашение No 075-15-2021-1085).