ИСТИНА

В связи с перспективами применения стволовых клеток в терапии дегенеративных, опухолевых, многих наследственных и других заболеваний детальный анализ регуляторных механизмов, обеспечивающих их жизнедеятельность, чрезвычайно актуален как для осуществления направленных воздействий, так и для выявления возможных негативных побочных эффектов. Одним из источников стволовых клеток являются региональные стволовые клетки, которые присутствуют практически во всех органах и тканях, в том числе мезенхимные стволовые клетки человека (МСК). В работах по изучению свойств МСК было показано, что ЭФР способен усиливать продукцию клетками ряда ростовых факторов и цитокинов, включая фактор роста эндотелия сосудов, фактор роста гепатоцитов, гепарин-связывающий ЭФР-подобный фактор роста и интерлейкин-6. Однако механизмы реализации эффектов ростовых факторов и внутриклеточная судьба их комплексов с соответствующими рецепторами в МСК практически не исследуются. Также не ставится вопрос о связи эндоцитоза рецептора ЭФР с активацией сигнальных путей в клетках. В связи с этим мы выбрали систему «ЭФР-рецептор» в качестве модели для изучения рецептор-опосредованного эндоцитоза в МСК. ЭФР, действующий на клетку через специфические трансмембранные рецепторы-тирозинкиназы, регулирует широкий спектр клеточных процессов. Поскольку в клетках разного типа уровень экспрессии рецептора ЭФР существенно отличается, нам важно было исследовать экспрессию и локализацию рецептора ЭФР в МСК. В качестве объекта были выбраны культивируемые МСК человека из десквамированного эндометрия менструальной крови (эМСК). Окраска рецептора ЭФР с помощью антител в клетках после стимуляции эндоцитоза добавлением ЭФР выявила в эМСК определенное количество рецептора ЭФР, достаточное для исследования его ассоциации с белками эндоцитозного пути методами иммунофлуоресцентной окраски и конфокальной микроскопии. Мы показали, что через 5 мин после стимуляции эндоцитоза добавлением 4 нМ ЭФР в клетках выявляется много мелких везикулярных структур, частично колокализующихся с маркером ранних эндосом ЕЕА1. К 15 мин эти эндосомы значительно укрупняются, перемещаются от периферии к центру клетки и большая их часть становится ассоциированной с ЕЕА1. Однако через 30–60 мин инкубации колокализация рецептора ЭФР с ЕЕА1 практически не обнаруживается. Мы предполагаем, что рецептор ЭФР способен интернализоваться в эМСК в составе эндосом, которые подвергаются созреванию. Таким образом, рецептор ЭФР, по мере прохождения по эндоцитозному пути, может осуществлять регуляцию важных процессов в клетке. Полученные данные являются предпосылкой для изучения роли рецептора ЭФР в сигнальных процессах в эМСК.