ИСТИНА

Функцию переноса кислорода у позвоночных выполняет молекула гемоглобина, состоящая из двух α- и двух β-полипептидных цепей, которые кодируются соответственно α- и β-глобиновыми генами. У теплокровных животных α- и β-глобиновые гены организованы в хроматиновые домены разного типа, и их экспрессия регулируется посредством разных механизмов. У холоднокровных позвоночных, в частности у тропической рыбы Danio rerio, α- и β‑ глобиновые гены кластеризованы. Главный локус глобиновых генов Danio rerio расположен на хромосоме 3 и включает α- и β- глобиновые гены эмбрионально-личиночного и взрослого типов, разделенные участком длиной 9 т.п.н.. Перед локусом находится ген C16orf35, внутри которого у теплокровных позвоночных животных находится главный регуляторный элемент (MRE) домена α-глобиновых генов. В настоящей работе с использованием техники транзиентной трансфекции эритроидных клеток генетическими конструкциями, содержащими репортерный ген под контролем потенциальных регуляторных элементов домена, были охарактеризованы промоторы взрослых и эмбрионально-личиночных глобиновых генов главного локуса. Далее, было продемонстрировано, что в 5 интроне гена C16orf35 присутствует функциональный аналог MRE теплокровных животных, который проявляет энхансерную активность в отношении промоторов как взрослых, так и эмбрионально-личиночных α- и β‑ глобиновых генов. Однако, с использованием метода фиксации конформации хромосом было показано, что MRE Danio rerio, расположенный в интроне гена C16orf35, сближен только с промоторами генов, которые экспрессируются в эритроцитах взрослых рыб, но не взаимодействует с промоторами глобиновых генов в эритроцитах на личиночной стадии развития. Более того, мы обнаружили, что между субдоменами взрослых и эмбрионально-личиночных глобиновых генов располагается инсуляторный элемент, который колокализуется с сайтом связывания CTCF.