ИСТИНА

Ингибирование путей биосинтеза соединений, жизненно необходимых микроорганизму Trypanosoma cruzi, рассматривается учёными как один из возможных механизмов действия потенциальных лекарств против болезни Шагаса, вызываемой данным паразитом. В качестве одного из таких механизмов мы рассматриваем ингибирование мембранного митохондриального фермента галактонолактоноксидазы из T. cruzi (TcGAL), катализирующего финальную стадию синтеза витамина С – антиоксиданта, который T. cruzi не способна усваивать извне и вынуждена синтезировать сама [1]. Учитывая, что TcGAL – водонерастворимый фермент, требующий применения специальной системы обращённых мицелл АОТ, предварительный скрининг ингибиторов целесообразно проводить с использованием гомологичного водорастворимого фермента L-галактон-1,4-лактондегидрогеназы из растения Arabidopsis thaliana, катализирующего ту же реакцию. В рамках данной работы изучено ингибирование TcGAL и AtGALDH соединениями класса аллилбензолов. Найдено, что природные аллилполиалкоксибензолы (АПАБ), такие как апиол, диллапиол и др., являются эффективными ингибиторами TcGAL с низким IС50 = 20–100 мкМ; установлен неконкурентный механизм действия апиола в отношении TcGAL. Конъюгирование АПАБ с трифенилфосфонием, обеспечивающим селективную доставку биологически активных веществ в митохондрии, позволяет повысить эффективность ингибирования по сравнению с немодифицированными АПАБ. Эффект АПАБ в отношении растительного фермента AtGALDH гораздо менее выражен чем для TcGAL, несмотря на высокое сходство активных центров. Это может быть обусловлено различным влиянием ингибитора на оксидазную и дегидрогеназную активность (оксидазная и дегидрогеназная для TcGAL и AtGALDH соответственно). Для подтверждения данной гипотезы было проведено сравнение ингибирования дикой формы AtGALDH и мутантной формы, обладающей оксидазной активностью. Обнаружено, что мутантная форма AtGALDH ингибируется лучше, чем дикая, однако значительно хуже, чем TcGAL. Причиной более низкой эффективности ингибирования обеих форм AtGALDH по сравнению с TcGAL видимо является распределение AtGALDH по всему объёму водной фазы мицелл, в то время как TcGAL располагается на границе раздела фаз, где согласно работе [2] локализованы ингибиторы класса АПАБ. Полученные результаты важны для понимания различий в функционировании мембранных ферментов различного происхождения: из растительных, животных и бактериальных источников. Литература 1. Chudin A.A., Kudryashova E.V. Analytica (MDPI), 2022, 3, 1. 2. Чудин А.А., Злотников И.Д., Крылов С.С., Семенов В.В., Кудряшова Е.В. Биохимия, 2023, 88, 1