ИСТИНА

(Со)полимерные стимулчувствительные микрогели являются вместительными контейнерами для недеструктивной иммобилизации биомолекул (например, ферментов), обеспечивая им высокогидратированное микроокружение, которое способствует сохранению биологической активности и функций. Способность подобных микрогелей изменять свой гидрофильно-гидрофобный баланс в зависимости от условий окружающей среды (температура, рН, состав растворителя) позволяет им легко адаптироваться к поверхностям различной природы, что представляет значительный интерес для конструирования (био)сенсоров. В данной работе методами пьезоэлектрического микровзвешивания с мониторингом диссипации и атомно-силовой микроскопии проведено исследование формирования и свойств микрогелевых и микрогель-ферментных покрытий и выявлены влияющие на них факторы. В качестве микрогеля был использован рН- и термочувствительный микрогель на основе N-изопропилакриламида и диметиламинопропилметакриламида (катионный сомономер), а в качестве фермента – глюкозооксидаза. Формирование микрогелевого покрытия проводили путем адсорбции микрогеля в незаряженном состоянии (рН 9.5), а последующее связывание полученным покрытием глюкозооксидазы – при рН 7, при котором микрогель заряжен положительно, а фермент (pI 4.3) обладает суммарным отрицательным зарядом (электростатическая иммобилизация). Обнаружено, что при рН 9.5 микрогель хорошо адсорбируется и прочно удерживается на относительно гидрофобной, модельной (золотой) поверхности, сохраняя свои стимулчувствительные свойства. Установлено, что при рН 7 частицы адсорбированного микрогеля способны связывать значительные количества глюкозооксидазы, не десорбируясь в результате взаимодействия с ферментом. Для создания биосенсорной системы на глюкозу использовали планарные графитовые электроды, модифицированные наночастицами диоксида марганца (медиатор), на поверхность которых последовательно наносили (адсорбция) сначала микрогель при рН 9.5, а затем глюкозооксидазу при рН 7. Показано, что полученная биосенсорная система обладает хорошими аналитическими характеристиками (чувствительность, предел обнаружения и предел количественного определения составляют 0,0031 A/(М·см2), 5 мкМ и 17 мкМ соответственно), широким линейным диапазоном при измерении глюкозы (7-3000 мкM), а также высокой операционной стабильностью. (с. 130)