ИСТИНА

В данной работе был проведен анализ эндоцитоза РЭФР в эндоме- триальных мезенхимных стволовых клетках человека (эМСК), МСК из жировой ткани и в иммортализованных клетках эпителиального проис- хождения (HeLa) биохимически и методом непрямой иммунофлуорес- центной микроскопии. Эндоцитоз стимулировали добавлением ЭФР. Показано, что количества РЭФР в эМСК и в клетках HeLa схожи. При этом РЭФР в нестимулированных клетках HeLa распределён равномерно по плазматической мембране, тогда как в эМСК локализован в основном на тя- жах, напоминающих стресс-фибриллы. После стимуляции эндоцитоза ЭФР в МСК эти структуры не исчезают, кроме того, появляются многочисленные мелкие везикулы, содержащие комплексы РЭФР-ЭФР. ЭФР в концентрации 100 нг/мл стимулирует формирование большего числа везикул, чем при низкой (12 нг/мл) концентрации. В отличие от клеток HeLa, даже через 60 мин после стимуляции эндоцитоза РЭФР-содержащие везикулы оста- ются мелкими и не перемещаются в околоядерную область. Методом иммуноблоттинга показано, что после добавления ЭФР происходит фос- форилирование как РЭФР, так и ERK1/2 во всех исследованных линиях. Однако, если в клетках HeLa уже через 20-40 мин фосфорилированные ERK1/2 и РЭФР не детектируются, то в эМСК эти белки активированы и че- рез 60 мин после стимуляции эндоцитоза. При этом в эМСК через 60 мин после стимуляции эндоцитоза наблюдается уменьшение количеств ERK1/2 и РЭФР в 2 раза, что не характерно для клеток HeLa.