ИСТИНА

Целью данной работы является исследование роли RGP классов 1 и 2 N. benthamiana в регуляции межклеточного транспорта вируса табачной мозаики (ВТМ). Анализ генома N. benthamiana показал наличие четырех генов RGP: RGP1, 2, 3 класса 1 с высокой идентичностью внутри группы, и RGP5 класса 2. Анализ экспрессии всех четырех генов RGP в растениях N. benthamiana с системной инфекцией ВТМ показал повышение уровня мРНК NbRGP1, 2 и 5 в ответ на инфекцию. Созданы генно-инженерные конструкции, кодирующие NbRGP1, 2, 3 и 5, для экспрессии в N. benthamiana и выполнен анализ влияния всех NbRGP на развитие инфекции ВТМ в листьях. Для имитации инфекции использовали вирусный вектор ВТМ:GFP на основе генома ВТМ, в котором ген белка оболочки заменен на GFP. При агробактериальном заражении клеток листа ВТМ:GFP инфекция распространяется лишь в смежные клетки, то есть происходит ближний транспорт вирусной РНК, который обеспечивается транспортным белком (ТБ) ВТМ. Анализ размера локальных очагов инфекции и интенсивности флуоресценции GFP дает количественную оценку состоянию межклеточного транспорта.