ИСТИНА

Ишемия головного мозга сопровождается нейродегенарацией, вследствие развития эксайтотоксичности, окислительного стресса, нейровоспаления и других патологических механизов. Ранее было показано вовлечение в эти процессы рецепторов, активируемых протеазами (PAR), относящихся к классу семидоменных рецепторов, связанных с G-белком. PAR1 активируются протеазами гемостаза – тромбином и активированнм протеином С (APC), которые индуцируют противоположные эффекты – анти- и провоспалительные, соответственно. Такое явление было названо «смещенным агонизмом», где результат определяется типом агониста рецептора – канонический или неканонический. Нами синтезированы пептиды-агонисты PAR1, которые имитируют действие АРС, активируя рецептор по неканоническому пути. В настоящей работе мы исследовали участие новых пептидов-агонистов PAR1 (пептиды, состоящие из 9-ти 11-ти аминокислот, АР9 и АР11) в ишемическом повреждении мозга: в моделях фотоиндуцированной ишемии на мышах in vivo и в моделях эксайтотоксичности и нейровоспаления in vitro на первичных культурах нейронов. Нами впервые на модели глутаматной эксайтотоксичности в первичных культурах нейронов продемонстрированы цитопротекторные эффекты пептидов – АР9 и АР11. Пептиды-агонисты PAR1 снижают апоптоз и активацию провоспалительного транскрипционного фактора NFkB при эксайтотоксичности в первичной культуре нейронов. АР9 стабилизировал уровень цитозольного Ca2+при вызванной глутаматом кальциевой перегрузки, что может лежать в основе нейропротекторного эффекта пептида. В экспериментах на мышах внутривенное введение АР9 способствовало стабилизации ГЭБ, уменьшению очага повреждения и сохранности неврологического статуса животных на фоне фотоиндуцированной ишемии. При этом, использование в экспериментах мышей, нокаутных по β-аррестину2, выявило необходимость данного белка для протекторного действия пептида. Известно, что усугубление повреждения при ишемии связано с запуском процесса воспаления в нервной ткани. Нами продемонстрировано непосредственное антивоспалительное действие АР9 на первичные нейроны при их сокультивировании с тромбин- и липополисахарид-активированными тучными клетками. Таким образом, PAR1 неканоническая активация с помощью АР9 может снижать целый ряд факторов, потенцирующих повреждение мозга при ишемии, а новый синтезированный пептид может явиться основой для разработки нового класса фармакологических препаратов нейропротекторного действия. Работа поддержана РНФ, проект 23-74-01144.