ИСТИНА

Введение. Активирующий транскрипционный фактор 5 (ATF5) – ДНК- связывающий транскрипционный фактор семейства bZIP. ATF5 участвует в дифференцировке, ответе клетки на различные стрессы, обеспечивает взаимодействие центриоли и перицентриолярного матрикса. Кроме того, ATF5 связывают с развитием онкологических заболеваний. 5’-нетранслируемая область (5’-НТО) мРНК ATF5 содержит две открытые рамки считывания (uORF), расположенные перед основной рамкой, кодирующей собственно транскрипционный фактор. Вторая рамка перекрывается с основной на 57 нуклеотидов и транслируется преимущественным образом в условиях отсутствия клеточных стрессов или недостатка аминокислот. В стрессовых условиях рибосомы после синтеза закодированного в uORF1 короткого пептида, реинициируют преимущественно на основной рамке считывания, минуя uORF2. Материалы и методы. Методы генной инженерии, in vitro транскрипция, РНК- интерференция, РНК-трансфекция клеточных культур HEK 293T, генетический нокаут. Результаты. Удаление первой открытой рамки считывания на 5’-НТО мРНК ATF5 не приводит к потере устойчивости трансляции этой мРНК к стрессу эндоплазматического ретикулума (ЭР-стресс). При этом замена первых 64 нуклеотидов 5’-НТО мРНК ATF5 без первой uORF на гетерологичные последовательности приводит к утрате такой устойчивости, в то время как замена других участков не влияет на устойчивость трансляции мРНК. Инактивация киназы mTOR в условиях ЭР-стресса делает трансляцию мРНК ATF5 чувствительной к фосфорилированию eIF2. Данный эффект не наблюдается в клетках с нокаутированным геном eIF4E-BP1. Выводы. 1. Первая открытая рамка считывания с 5’-НТО мРНК ATF5 не является необходимой для устойчивой к ЭР-стрессу трансляции. 2. Первые 64 нуклеотидов 5’-НТО мРНК ATF5 необходимы для трансляции мРНК АТF5 в условиях окислительного стресса и ЭР-стресса. 3. Для устойчивой к инактивации eIF2 трансляции мРНК ATF5 необходима активность киназы mTOR. 4. Инактивация eIF4E при ингибировании mTOR специфически блокирует трансляцию ATF5 при ЭР-стрессе.