ИСТИНА

Резистентность опухолевых клеток к терапии представляет собой серьёзную проблему онкологии. Известно, что развитие опухоли зачастую происходит в условиях гипоксии, что способствует возникновению устойчивости к химиотерапевтическим препаратам. В представленной работе использовали пульсовую модель селекции клеток, резистентных к цисплатину, наиболее точно воспроизводящую условия курсового лечения пациентов с онкологическими заболеваниями. Было обнаружено, что резистентность может развиваться вследствие снижения чувствительности к индукторам гибели клеток, однако, она также возникала за счёт подавления пролиферации клеток и их метаболической активности. Была предложена оптимальная стратегия исследования механизма резистентности клеток, включающая в себя методы оценки жизнеспособности клеток (MTS/MTT), live-dead assay, клоногенный тест, прижизненный анализ метаболизма и анализ содержания белков клетки методом вестерн-блот. В работе также установлено, что гипоксическое микроокружение клеток способствует резистентности к ряду химиотерапевтических препаратов и ключевую роль в этом процессе играют митохондрии. Один из путей антиапоптотического действия гипоксии основан на подавлении механизмов пермеабилизации внешней мембраны митохондрий за счёт снижения экспрессии или нарушения функции проапоптотических белков семейства Bcl-2, формирующих пору на мембране. Показана роль транскрипционного фактора p53 в этом процессе и изменение его уровня при гипоксии. Другой причиной снижения чувствительности опухолевых клеток к цитотоксическим препаратам в условиях гипоксии оказалась стимуляция митофагии – удаления дефектных митохондрий, имеющих сниженный мембранный потенциал, в которых запущен процесс пермабилизации внешней мемраны, что ведет к апоптозу. Таким образом, гипоксия влияет на митохондрии, подавляя процесс пермеабилизации внешней митохондриальной мембраны за счёт изменения экспрессии белков Bcl-2-семейства, и удаляя повреждённые митохондрии, тем самым эффективно защищая клетки опухоли от стимуляции апоптоза. Уровень различных белков, вовлеченных в процесс митофагии, контроля качества митохондрий, был проанализирован у пациентов с аденокарциномой лёгкого (АКЛ) в образцах как опухолевой, так и нормальной ткани. Используя полученные данные, была построена и подтверждена номограмма, сочетающая клинико-патологические особенности и уровни митохондриальных белков, что позволяет прогнозировать выживаемость пациентов.