ИСТИНА

Линия крыс Крушинского-Молодкиной (КМ) – модель рефлекторной (аудиогенной) эпилепсии (АЭ) с высокой воспроизводимостью признака. Кроме АЭ на крысах линии КМ возможно получить модель височной эпилепсии человека - миоклонический гиперкинез. При поиске новых подходов и инструментов, способных повлиять на АЭ и послесудорожные изменения мышечного тонуса крыс, мы остановились на нефармакологическом неинвазивном методе - электросудорожной терапии (ЭСТ). Целью работы является исследование эффектов ЭСТ на поведение, биохимические параметры мозга, а также показатели АЭ у крыс с различной предрасположенностью к АЭ. В экспериментах использовали линию крыс линии КМ (n = 81), также крыс линии «4» (n = 22) и линии «0» (n = 24). Данные линии представляют собой линии контроля со сходным КМ генетическим фоном. У них одинаковый генотип, но диаметрально противоположный фенотип – аудиогенный припадок (АП) максимальной выраженности (линия «4») и полное отсутствие признака (линия «0»). В общую схему опыта входило проведение стандартной батареи тестов (тест «Открытое поле», тест в приподнятом крестообразном лабиринте, тест «Вынужденное плавание»), формирование у части крыс миоклонических судорог ежедневой провокацией АП на протяжении 21 дня, ЭСТ в течение 6 дней и в конце, в зависимости от серии, либо повторное тестирование поведение, либо декапитация и диссекция с последующим биохимическим анализом мозга. Содержание моноаминов и их метаболитов определяли методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с электрохимическим детектированием (ВЭЖХ-ЭД) в образцах префронтальной коры и стриатума экспериментальных животных. Было показано, что интенсивность АП, миоклонических судорог и постиктальной каталепсии крыс линии КМ и линии «4» после 6- дневного курса ЭСТ снижается, причем данный эффект более выражен у крыс линии КМ. Воздействие ЭСТ на поведение крыс линии КМ и линий «4» и «0» имело разнонаправленный эффект. Несмотря на отсутствие статистически значимых изменений в показателях поведения, были выявлены различия в уровне вертикальной и горизонтальной локомоторной активности в тесте «открытое поле» у крыс разных групп. Это связано со сходством генетического «фона»: крысы линий «0» и «4», как относительно близкородственные (хоть и демонстрирующие абсолютно противоположный фенотип АП) показали увеличение исследовательской и локомоторной активности, в то время как у линии КМ снизился только показатель исследовательской активности и других отличий не выявлено. Различие в реакции крыс линии КМ и линии «4» на процедуру ЭСТ также может указывать на различные механизмы эпилептогенеза, т.е. на наличие особенностей метаболизма, повышающих или понижающих уровень судорожной готовности. Это заключение согласуется с различиями в противосудорожной эффективности ЭСТ в ее влиянии на миоклонические судороги: у линии КМ – 94% полного купирования миоклонических судорог, у линии «4» - 36%. У части крыс наблюдался «двуволновый» АП, что может говорить как о сильном противоэпилептическом эффекте ЭСТ, так и об избирательном действии последней (воздействие только на первичный, стволовой очаг, но не на передне-мозговой). Таким образом, ЭСТ повышает уровень локомоторной активности у крыс линии «4» и «0» и снижает исследовательскую активность крыс линии КМ в тесте «открытое поле». В то же время в тестах «вынужденное плавание» и «приподнятый крестообразный лабиринт» статистически значимых отличий между группами не обнаружено. Было показано, что ЭСТ интенсифицирует функционирование дофаминергической системы в стриатуме и префронтальной коре (ПФК) у крыс линии КМ, что выражается в повышении уровня дофамина и его основных метаболитов (3-МТ, ДОФУК, ГВК). Кроме того, показана модуляция функций серотонинергической системы в стриатуме и ПФК крыс линии КМ и повышение содержания свободного серотонина в указанных структурах мозга. Так, в ПФК у крыс с выработанным миоклонусом соотношение ГИУК/5- НТ указывает на усиленный метаболизм нейромедиатора в неокортексе. Однако, такое резкое отклонение от контрольных значений, обнаруженных у интактных крыс, может быть связано с накоплением ГИУК в системе и сильным снижением 5- НТ, что ассоциировано с повышенной судорожной готовностью и возникновением нового, вторичного очага возбуждения в коре. Примечательно, что у животных с миоклонусом после ЭСТ количество серотонина в ПФК сопоставимо со значениями у интактных животных, а это, по всей видимости, может объяснять противоэпилептический эффект ЭСТ и элиминацию «передне-мозговых» судорог.