ИСТИНА

Сенесцентное состояние клеток играет важную роль в клеточном метаболизме, связано с иммуно-онкологией и патогенезом рака. Было показано, что это состояние может способствовать прогрессии опухоли, что делает актуальным поиск сенолитиков для уничтожения сенесцентных клеток. Сигнальный путь TRAIL — компонент иммунной системы, обеспечивающий иммунный контроль, отслеживание и уничтожение трансформированных клеток. DR5 является основным индуктором апоптоза по сигнальному пути TRAIL. Ранее было показано, что агонисты рецепторов DR5 проявляют сенолитическую активность, избирательно уничтожая индуцированные терапией сенесцентные клетки. Была исследована вызванная темозоломидом сенесцентность в клеточных линиях глиобластомы и выявлен сенолитический потенциал агониста DR5, DR5-селективного варианта цитокина TRAIL DR5-B. Сенесцентность определялась по сочетанию маркеров: снижению пролиферации, увеличению размера клеток и ядер, окрашиванию на β-галактозидазу и уровню экспрессии p21. Клетки глиобластомы неоднородно реагировали на обработку темозоломидом, при этом маркеры сенесцентности были наиболее выражены в клеточной линии U87MG. Кроме того, в клетках U87MG, подвергшихся воздействию темозоломида, усиливалась автофлуоресценция липофусцина - пигмента, ассоциированного с клеточным старением. Метаболический имиджинг на основе флуоресцентной микроскопии с временным разрешением (FLIM) по автофлуоресценции NADH показал метаболический сдвиг в сторону гликолиза в клетках U87MG, обработанных темозоломидом, в отличие от сдвига в сторону окислительного фосфорилирования в клетках T98G. Приобретение клетками U87MG признаков сенесцентности сопровождалось увеличением экспрессии рецептора DR5 и других компонентов сигнального пути TRAIL (DcR1, DcR2, cFLIP), а также сенсибилизацией к DR5-опосредованному апоптозу. Сравнительный биоинформатический анализ дифференциальной экспрессии генов, ассоциированных с сенесцентностью, стволовостью, пролиферацией и DR5-опосредованной сигнализацией в клетках U87MG, обработанных темозоломидом, выявил активацию провоспалительных сигнальных путей, сопровождающуюся снижением активности генов, связанных с метаболизмом ДНК и клеточным циклом, а также значительным усилением проапоптотической сигнализации. Поскольку TRAIL играет важную роль в иммунном надзоре, это позволяет предположить, что сенесцентные клетки глиобластомы могут быть более восприимчивы к противоопухолевому иммунному ответу. Таким образом, агонисты рецептора DR5 могут обладать терапевтическим потенциалом при глиобластоме после лечения темозоломидом. Однако гетерогенная реакция клеток глиобластомы на индукцию сенесцентности требует тщательного изучения и должна учитываться при разработке стратегий сенолитической терапии. Исследование выполнено за счет гранта РНФ №24-24-00222.