ИСТИНА

Полиморфноядерные лейкоциты, основную часть которых составляют нейтрофилы, являются частью системы врожденного иммунитета и обеспечивают совместно с макрофагами первую линию защиты организма от патогенов. Нейтрофилы осуществляют фагоцитоз микроорганизмов и чужеродных частиц и их деградацию внутри клетки. Выполнение защитной функции в нейтрофилах сопровождается запуском апоптоза [1]. Известно, что в регуляции функций нейтрофилов участвует оксид азота (II), который ингибирует выработку супероксид-иона в активированных клетках, воздействует на продукцию цитокинов и хемокинов, а также влияет на взаимодействие нейтрофилов с объектами фагоцитоза. При активации нейтрофилов через моделирование процесса фагоцитоза путем добавления частиц опсонизованного зимозана (ОЗ) наблюдается существенное увеличение продукции NO [2]. Мы предположили, что оксид азота может индуцировать апоптоз у фагоцитирующих нейтрофилов. В качестве донора экзогенного NO в ходе работы использовали 3,3-диэтил-1,2-диокситриазен натрия (коммерческое название – DEA Nonoate). Количество апоптотических клеток исследовалось методом проточной цитофлуориметрии по связыванию флуоресцентно меченного белка аннексина V с фосфатидилсерином и пропидий йодида (PI) с фрагментированной ДНК нейтрофилов. Установлено, что опсонизированный зимозан увеличивает количество апоптотических клеток по отношению к контролю. Добавление NO за 15 мин до зимозана (и, соответственно, до начала фагоцитоза) не влияет на индуцированный зимозаном апоптоз. Однако, при добавлении двух сильных индукторов апоптоза - OЗ и NO одновременно или же при добавлении NO через 5 мин после добавления ОЗ (и начала фагоцитоза) наблюдается ингибирование апоптоза в «фагоцитирующих» клетках. В процессе фагоцитоза происходит активация нейтрофилов, включая синтез физиологически активных веществ – эйкозаноидов из арахидоновой кислоты [3]. В нашей работе экспериментально показано, что 5-оксо-эйкозотетраеновая кислота (5-oxo-ETE), добавленная экзогенно, является ингибитором апоптоза в «фагоцитирующих» клетках. Возможно, NO сдвигает 5-липоксигеназный каскад в сторону образования 5-оксо-ЕТЕ, которая опосредует эффекты NO, связанные с ингибированием апоптоза в фагоцитирующих нейтрофилах. 1. Ян Кольман Я., Рем К., Вирт Ю. Наглядная биохимия. М.: Мир, 2000. C. 210-230. 2. Zagryazhskaya AN, Lindner SC, Grishina ZV, Galkina SI, Steinhilber D, Sud'ina GF. Nitric oxide mediates distinct effects of various LPS chemotypes on phagocytosis and leukotriene synthesis in human neutrophils. // Int J Biochem Cell Biol. 2010. V. 42. p.921-931. 3. Williams JD, Lee TH, Lewis RA, Austen F. Intracellular retention of the 5-lipoxygenase pathway product, leukotriene B4, by human neutrophils activated with unopsonized zymosan. // J Immunol. 1985. V. 134. p.2624-2630.