ИСТИНА

Существует востребованность в щелочных протеазах и, протеазах с активностями белков системы гемостаза. Для отбора продуцентов этих ферментов изучали спектр экзопротеаз у новых видов и штаммов алкалофилов Sodiomyces alkalinus, S. magadii, Chordomyces antarcticum, Acrostalagmus luteoalbus, Verticillium zaregamsianum, алкалотолеранта Gibellulopsis nigrescens, энтопопатогенов и нематофагов Beauveria bassiana, Purpureocillium lilacinum, Paecilomyces carneus, Tolypocladium sp., T. cylindrosporum, T. inflatum и сапротрофов Aspergillus sclerotiorum, A. nidulans и A. ochraceus. Протеолитическую активность определяли в культуральной жидкости по азоказеину, коллагенолитическую – по азоколлу, фибриногенолитическую - по фибриногену, специфическую активность протеиназ – по синтетическим пептидным пара-нитроанилидным субстратам для эндопептидаз и экзопептидаз, субстратам Xa-фактора плазмы крови, плазмина, тромбина, активированного протеина С, тканевого активатора плазминогена. Найдены штаммы с высокой фибринолитической активностью и активаторной к протеину С. Оптимизированы условия их культивирования, проведена первичная очистка ферментов и охарактеризованы их свойства. Показан непрямой механизм фибринолитического действия, обусловленный активаторной к плазминогену и АРС-подобной активностями у одного из штаммов. Высокие активности протеаз в условиях близких к крови позволяют предполагать их эффективное действие in vivo. Среди алкалофилов и алкалотолерантов выявлены штаммы, обладающие высокой общей протеолитической, металлопротеазной, субтилизиноподобной, дипептидил-пептидазной и аминопептидазной активностями в щелочных условиях. Металлопротеиназы вносят основной вклад в активность протеаз у C. antarcticum. Обнаружена редкая для грибов активность цистеиновых протеиназ. Отобраны штаммы с высокой активностью протеаз при рН 6-10, повышенном содержании NaCl, Triton X-100, SDS и детергента Ariel, Н2О2 и жидкого пятновыводителя Vanish Oxi Action, что показывает на возможность их практического применения.