ИСТИНА

Целью данной работы является создание полиэлектролитного ферментного микродиагностикума как средства микро- и наноразмерной величины, позволяющего распознавать и количественно определять низкомолекулярные вещества в нативных биологических жидкостях. Такой микродиагностикум выполнен в виде ансамбля полиэлектролитных микрокапсул (ПЭ-микрокапсул) с включенным в них ферментом, оболочки которых состоят из чередующихся слоев поликатиона и полианиона. Технология изготовления капсул позволяет варьировать их диаметр от 2 до 10 мкм и толщину оболочки от 10 до 100 нм. Важным свойством оболочки ПНМК является ее полупроницаемость — проницаемость для низкомолекулярных соединений и непроницаемость для высокомолекулярных веществ и крупных частиц. Благодаря этому свойству полиэлектролитной оболочки, содержащая фермент микрокапсула, помещенная в многокомпонентную среду, становится анализатором в ней низкомолекулярных веществ — субстратов, ингибиторов или активаторов инкапсулированного фермента. В качестве объекта, были выбраны ЛДГ и уреаза, микродиагностикумы на лактат и мочевину соответственно. Из полученных данных следует, что по сравнению с существующими в медицине ферментативными клинико-биохимическими методами анализа биожидкостей предлагаемый нами микродиагнотикум имеет явные преимущества. Фермент, включенный в мультислойную полиэлектролитную капсулу, может, по предварительным данным, сохранять свою активность в течение нескольких месяцев, в то время как активность фермента в растворе, «в свободном» состоянии падает практически до нуля в течение нескольких дней. Фермент, включенный в полиэлектролитную капсулу, полностью сохраняет свою активность в анализируемой биологической жидкости, содержащей протеиназы, что исключает необходимость достаточно трудоемкого удаления протеиназ из анализируемой биологической жидкости. Микродиагностикум позволяет проводить анализ биожидкости без ее предварительного фракционирования. Предлагаемый нами способ дает возможность многократного использования микродиагностикума. Следует отметить, что в одной полиэлектролитной капсуле содержится лишь десятки пикограммов фермента. Предлагаемый способ в перспективе позволит определять концентрации анализируемого вещества с помощью нескольких или даже одной капсулы, когда оболочка помечена флуоресцентной или радиоактивной меткой