ИСТИНА

Методы «отпечатков пальцев» основаны на получении какого-либо спектра или хроматограммы объекта и его (ее) хемометрической обработке. Такой подход позволяет, в принципе, как распознавать (различать между собой) объекты, так и проводить одновременное определение в них нескольких компонентов. Публикации, посвященные таким методам, сейчас довольно многочисленны. Однако такой подход ограниченно применим для соединений, не обладающих собственным поглощением в УФ-видимой области и собственной флуоресценцией. Даже хроматографическое определение таких соединений обычно проводят с использованием дериватизации. В связи с этим интересно было бы расширить возможности метода «отпечатков пальцев» на определение непоглощающих и нефлуоресцирующих аналитов (и, соответственно, распознавание матриц, содержащих таковые). Для этого в качестве аналитического сигнала можно было бы использовать изменение аналитами интенсивности флуоресценции флуорофоров, применяемых как аналитический реагент. Аналогом предлагаемого подхода можно также считать «электронный язык», в котором электроактивные аналиты изменяют сигнал полуселективных сенсоров. В данной работе в качестве такого реагента предложено использовать смесь флуорофоров – органических красителей и квантовых точек, совокупная эмиссия которой наблюдается в широкой области спектра (400–650 нм). В смесях использованы новые флуорофоры (родамин и флуоресцеин, закрепленные на наночастицах кремнезема с помощью полиэтиленимина, а также основание Шиффа, полученное из полиэтиленимина и о-фталевого диальдегида); использованы также квантовые точки CdSe и Ag2S. Обнаружено, что закрепление флуорофора на наночастицах SiO2 усиливает влияние модельных аналитов на интенсивность флуоресценции (предположительно, за счет сорбции аналита и сближения с флуорофором; распознавание смесей с истинно растворенными красителями менее эффективно). Для использования в развиваемом методе составлены смеси, включающие до пяти флуорофоров. В смеси флуорофоры могут заметно тушить флуоресценцию друг друга. В качестве модельных аналитов использовали лекарственные вещества (антибиотики разных классов, сульфаниламиды и др.). Изучение влияния отдельных аналитов на спектры эмиссии отдельных флуорофоров показало, что аналиты по-разному влияют на флуоресценцию разных флуорофоров. В то же время, эмиссия смеси флуорофоров тушится аналитами иначе, чем индивидуальные флуорофоры. Для четырех аналитов (амикацин, пирацетам, сульфаметоксазол, хлорамфеникол) показана возможность распознавать как отдельные аналиты, так и их попарные и некоторые тройные смеси (при равных концентрациях аналитов), обрабатывая спектры флуоресценции методом главных компонент. Эффективность распознавания количественно оценивали, рассчитывая «class distance» – относительную дисперсию групп сигналов. Распознавание смесей аналитов возможно как в воде, так и в присутствии плазмы крови после осаждения белка, причем оно наиболее эффективно с использованием смесей 3-4-х флуорофоров. Альтернативный предлагаемому метод распознавания, основанный на получении УФ-спектров смесей аналитов и их обработке по методу главных компонент, менее эффективен.