Описание:Программа спецкурса «Методы физиологического эксперимента» для студентов 3 курса кафедры биоорганической химии биологического факультета МГУ 1. Медиаторы симпатических и парасимпатических нейронов: пост- и пресинаптические рецепторы. Методы исследования симпатической нейропередачи: электрохимический метод исследования секреции норадреналина, измерение концентрации ионов кальция в цитоплазме нервных волокон. 2. Потенциалы действия (ПД) клеток водителя ритма сердца и рабочего миокарда при регистрации с помощью внутриклеточных микроэлектродов. Исследование ионных механизмов ПД с использованием метода фиксации потенциала. Метод локальной фиксации потенциала (patch clamp), принцип и применение. 3. Оптическое картирование сердца: принцип метода. Феномен миграции водителя ритма в пределах синоатриального узла как один из способов изменения частоты сердцебиений. Эктопические очаги автоматии, феномен reentry. 4. Электрокардиограмма: регистрация с использованием стандартных отведений Эйнтховена. Зависимость формы ЭКГ от положения электрической оси сердца. 5. Механизм сокращения гладкой мышцы. Исследование роли ионов кальция в сокращении гладкой мышцы: методы пермеабилизации клеточной мембраны («скинирования» клеток) и измерения внутриклеточной концентрации ионов кальция с помощью флуоресцентных красителей. Понятие о ратиометрических (ratiometric) флуоресцентных индикаторах (fura-2). Нагружение клеток флуоресцентными индикаторами с использованием их гидрофобных ацетометильных форм. Феномен повышения/снижения чувствительности сократительного аппарата гладкомышечных клеток к ионам кальция при действии веществ-регуляторов, примеры такого влияния. 6. Тоническая активность симпатической нервной системы, частота разрядов симпатических нейронов в состоянии покоя. Механизм формирования пачек импульсов, синхронных с ритмом пульса. Дыхательная модуляция эфферентной симпатической активности. Микронейрографический метод регистрации активности симпатических волокон у человека. Рефлекторные изменения симпатической активности при снижении/повышении артериального давления, изменении положения тела (ортостазе). 7. Методы регистрации параметров гемодинамики у человека и лабораторных животных. Неинвазивные методы измерения АД: в плечевой артерии у человека и в хвостовой артерии у крыс (tail-cuff). Непрерывная регистрация артериального давления у человека методом «разгруженной артерии». Регистрация АД у животных через вживленный катетер и с использованием телеметрических технологий. Изменения АД в течение суток, возможные механизмы. 8. Методы измерения минутного объема сердца: метод Фика и метод разведения индикатора. Определение размеров и ударного объема сердца с помощью ультразвуковой эхографии. Изменения минутного объема, ударного объема и фракции выброса при интенсивной физической нагрузке, механизмы этих изменений. Механизмы положительного инотропного влияния катехоламинов. 9. Методы измерения скорости кровотока: окклюзионная плетизмография, ультразвуковая Допплеровская флоуметрия, transit-time ультразвуковая флоуметрия. Распределение минутного объема сердца между органами в состоянии покоя, при физической нагрузке и при кровопотере. Механизмы перераспределения минутного объема при изменении функционального состояния организма. 10. Индукция антителогенеза к веществам с малой молекулярной массой с использованием белковых конъюгатов. Механизмы первичного и вторичного иммунного ответа. Принцип метода иммуноферментного анализа (ELISA). Конкурентный анализ: тестирование афинности антител. Группы крови человека и резус-фактор. Принципы совместимости групп при переливании крови. 11. Измерение дыхательных объемов у человека методом спирометрии. Понятия: дыхательный объем, резервные объемы вдоха и выдоха, жизненная емкость легких, остаточный объем, мертвое пространство. Определение функциональной остаточной емкости методом разведения гелия. Измерение «давления в плевральной полости» путем ведения зонда в пищевод: изменение давления при вдохе и выдохе. Тестирование проводимости дыхательных путей, индекс Тиффно. Измерение вентиляции и перфузии в различных участках легкого. (По материалам учебников и лекции) 12. Исследование фильтрационной функции почек: определение скорости клубочковой фильтрации. Механизмы концентрирования мочи в проксимальном канальце, петле Генле и дистальном канальце. Гормоны, регулирующие функцию почки (вазопрессин, предсердный натрийуретический гормон, альдостерон): стимулы, стимулирующие секрецию, механизмы действия этих гормонов.