Получение и оценка иммуногенных свойств рекомбинантного химерного белка на основе антигенов Rv3619, Rv3620, Rv1813, Rv2608 Mycobacterium tuberculosisдипломная работа (Бакалавр)
Организация, в которой проходила защита:
ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М.Сеченова МЗ РФ
Год защиты:2015
Аннотация:Вопрос создания новых противотуберкулезных вакцин остро стоит как в России, так и во всем мире. По данным ВОЗ ежегодно в мире туберкулезом заболевает 10 миллионов человек, 3 миллиона погибают.
В последнее время широкое распространение получили субъединичные вакцины. Большое количество подобных противотуберкулезных вакцин в настоящее время проходит клинические испытания. К преимуществам таких вакцин относят снижение вероятности побочных эффектов, что особенно важно для населения из групп риска (иммунодефицитные состояния, носительство M.tuberculosis), и возможность применения как отдельно, так и совместно с вакциной БЦЖ.
Антигены микобактерии туберкулеза можно условно разделить на три группы: секретируемые, структурные и антигены, преимущественно синтезирующиеся в дормантных условиях. При разработке субъединичных вакцин важным является выбор такой антигенной композиции, которая бы включала в себя антигены всех трех групп. Целью данной работы являлось получение химерного белка на основе антигенов M.tuberculosis Rv1813 (антиген, экспрессирующийся в дормантных условиях), Rv2608 (структурный антиген семейства PE/PPE), Rv3619, Rv3620 (секреторные антигены семейства ESAT-6).
В ходе представленной работы был получен плазмидный вектор, содержащий в одной рамке считывания оптимизированные последовательности, кодирующие антигены Rv1813, Rv2608, Rv3619, Rv3620. Для экспрессии химерного белка использовали клетки E.coli. Очистку проводили методом аффинной хроматографии. Иммуногенность полученного препарата была показана в экспериментах in vivo.
Таким образом, был получен бактериальный продуцент химерного белка на основе антигенов M.tuberculosis Rv1813, Rv2608, Rv3619 и Rv3620; отработаны условия продукции и очистки, а также показана иммуногенность полученного препарата химерного антигена. Результаты работы планируется использовать для разработки новой субъединичной вакцины от туберкулеза.