Создание штамма продуцента, экспрессирующего слитый белок, состоящий из белка теплового шока A1B и эпитопов аррестина человекадипломная работа (Специалист)
Организация, в которой проходила защита:
ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет)
Год защиты:2018
Аннотация:Тема научно-исследовательской работы (НИР) "Создание штамма продуцента, экспрессирующего слитый белок, состоящий из белка теплового шока человека A1B и эпитопов аррестина человека".
Данная НИР посвящена проблеме создания противоопухолевого иммунопрепарата - вакцины, базисным началом которой является слитый белок, состоящий из HSP70 человека и опухолеспецифичных эпитопов аррестина человека, обладающих высокой аффинностью к молекулам MHC классов I и II. Аррестин человека является опухолеспецифичным раково-сетчаточным антигеном (в норме он экспрессируется только в сетчатке глаза). Аррестин и плазмида, кодирующая HSPA1B, были выбраны нами для исследования и последующего создания штамма продуцента и наработки слитого белка.
Работа состоит из трех глав.
В первой главе рассматриваются теоретические аспекты выбранной темы. Изучены характеристика и свойства злокачественных новообразований, факторы риска возникновения рака, применяемые в клинической практике противоопухолевые препараты, а также белки теплового шока человека и их роль в противоопухолевом иммунном ответе. Рассмотрены перспективы использования вакцин на основе HSP-пептидных комплексов.
Во второй главе представлены материалы и методы исследования. Подробно описана подборка эпитопов через компьютерные базы данных, их наработка с помощью метода ПЦР, создание плазмидных векторов со вставками эпитопов аррестина и экспрессия искомого слитого белка.
Третья глава посвящена анализу результатов. Изучено строение плазмидных векторов со всеми сайтами рестрикции, их структура, а также размер наработанных плазмидных ДНК. Также при помощи белкового электрофореза проведено фиксирование результатов наработки рекомбинантных белков до и после индукции клеток штамма-продуцента JM109. Изучены молекулярное массы полученных белков.
Общий объем работы составляет 83 страницы. Научно-исследовательская работа содержит 9 рисунков. В ходе написания работы было использовано 77 литературных источников, в том числе 57 - на иностранном языке.