Аннотация:Хромосомные транслокации – характерная черта многих неоплазий, в особенности злокачественных заболеваний кроветворной системы. Одно из таких заболеваний – лимфома Беркитта. Признаком этой лимфомы является наличие в опухолевых клетках транслокации t(8;14), соединяющей ген MYC и локус IGH. Лимфома Беркитта встречается с высокой частотой у ВИЧ-инфицированных пациентов, однако причины такой закономерности остаются не ясными. Предполагается, что белки ВИЧ могут влиять на хроматин, вызывая образование перестройки MYC-IGH.
Существующие клеточные модели транслокации t(8;14) позволяют изучать, как функционирование и пролиферация клеток меняются после возникновения этой перестройки. Однако на сегодняшний день нет клеточных моделей, в которых можно было бы изучать механизмы формирования этой перестройки. Для возникновения хромосомной транслокации гены-партнеры должны сблизиться в пространстве ядра. Для изучения динамики хроматина необходимо создавать клеточные модели для наблюдения за локусами интереса в живой клетке в реальном времени. С помощью моделей, в которых будут визуализированы локусы MYC и IGH, можно будет исследовать влияние белков ВИЧ на динамику хроматина и образование транслокации t(8;14). Кроме того, такие клеточные модели расширят представление о фундаментальных особенностях подвижности хроматина.
Для визуализации локусов MYC и IGH в настоящей работе используется новая система ANCHOR. В локус интереса встраивается небольшая последовательность ANCH, с которой связываются флуоресцентные OR-белки. Этот способ наблюдений не нарушает нативную динамику хроматина и позволяет получать репрезентативные данные о расположении и подвижности локусов хроматина.