|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
Влияние положения последовательности His6 на экспрессию и свойства фенилацетонмонооксигеназы из Thermobifida fuscaдипломная работа (Бакалавр)
- Научные руководители: Тишков В.И., Пометун А.А., Паршин Павел Дмитриевич
- Автор: Мартысюк Устина Александровна
- Тип: Бакалавр
- Организация, в которой проходила защита: ФГБОУ ВО «Российский химико-технологический университет имени Д.И. Менделеева»
- Год защиты: 2021
- Аннотация: Известно, что введение в последовательность белка дополнительного полипептидного фрагмента (аффинного тега) позволяет легко очищать белки как из эукариотических организмов, так и из прокариотических. Один из наиболее широко используемых подходов – введение на N- или С-конец белка последовательности из шести или более аминокислотных остатков гистидина (His6). Добавление подобных полипептидных тегов может различно влиять на белок: улучшать растворимость, решать проблемы фолдинга, повышать уровень экспрессии, или наоборот, оказывать негативное влияние. В литературе не представлена информация о влиянии наличия и расположения гистидиновой метки на PAMO – а РАМО-L. Поэтому, в данной работе были получены варианты фермента с расположением His6 на N- и C-концах полипептидной цепи фермента (PAMO N и PAMO C соответственно). Кроме того, было интересно выяснить функциональную роль дополнительного полипептида между С-концом РАМО и His6, предложенного другими авторами ранее. Для этой цели был получен вариант фермента PAMO L, в котором His6 на С-конце был отделен полипептидом из 19 аминокислотных остатков.
- Добавил в систему: Тишков Владимир Иванович