|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
ПОЛУЧЕНИЕ И ХАРАКТЕРИСТИКА ДИФФЕРЕНЦИРОВАННЫХ ПРОИЗВОДНЫХ ИНДУЦИРОВАННЫХ ПЛЮРИПОТЕНТНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК С ПОНИЖЕННОЙ ИММУНОГЕННОСТЬЮдипломная работа (Бакалавр)
- Научные руководители: Лагарькова М.А., Богомякова М.Е.
- Автор: Секретова Е.К.
- Тип: Бакалавр
- Организация, в которой проходила защита: МГУ имени М.В. Ломоносова, кафедра клеточной биологии и гистологии биологического факультета МГУ
- Год защиты: 2021
- Аннотация: Индуцированные плюрипотентные стволовые клетки (ИПСК) обладают способностью к неограниченной пролиферации и дифференцировке во все типы взрослых соматических клеток. Благодаря этим свойствам ИПСК рассматриваются как потенциальный ресурс для клеточной терапии.(Takahashi, Yamanaka, 2006). Трансплантация аутологичных дифференцированных производных ИПСК теоретически не должна приводить к иммунному отторжению, однако длительная длительные и дорогостоящая дорогостоящие технология технологии получения, дифференцировки и клинической сертификации аутологичных ИПСК и их производных значительно затрудняют их широкое клиническое использование (Mandai et al., 2017). В связи с этим аллогенные производные ИПСК на данный момент являются более предпочтительным источником клеток для заместительной терапии. Аллогенная трансплантация всегда сопровождается иммунным ответом, обусловленном несовпадением антигенов HLA между донором и реципиентом, а также наличием минорных антигенов гистосовместимости на поверхности всех клеток. В классической трансплантологии проблему иммунного отторжения решают при помощи иммуносупрессивной терапии, которая провоцирует множество побочных эффектов, включая повышенный риск развития инфекций и злокачественных новообразований у пациента (Murphy, Weaver, 2017). Интересной альтернативой привычной иммуносупрессиии могут стать «универсальные» клеточные линии ИПСК с пониженной иммуногенностью, производные которых потенциально будут подходить любому реципиенту, не вызывая иммунного ответа (Zheng, Wang et al., 2016). Один из возможных подходов к созданию таких гипоиммуногенных линий ИПСК – это делеция гена бета-2-микроглобулина (b2m), продукт которого представляет собой константную цепь молекулы HLA I класса. Отсутствие молекул HLA-I будет снижать иммуногенность клеток по отношению к CD8+ Т-лимфоцитам, однако это может стать причиной повышенного NK-клеточного лизиса. ЦЕЛЬ: получение фибробластоподобных производных ИПСК с нокаутом гена b2m и изучение их иммуногенности in vitro. ЗАДАЧИ РАБОТЫ: 1) Провести направленную дифференцировку ИПСК с нокаутом гена b2m и соответствующих изогенных линий дикого типа в фибробластоподобные производные. 2) Оценить иммуногенность фибробластоподобных производных ИПСК по отношению к NK и CD8+ Т-клеткам. 3) В целях увеличения выборки для дальнейших исследований иммуногенности получить новые линии ИПСК с биаллельным нокаутом гена b2m при помощи метода геномного редактирования CRISPR/Cas9, охарактеризовать новые линии по маркерам и функциональным свойствам плюрипотентности.
- Добавил в систему: Богомякова Маргарита Евгеньевна