|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
ВЛИЯНИЕ ШАПЕРОНОВ НА ПАТОЛОГИЧЕСКУЮ ТРАНСФОРМАЦИЮ АМИЛОИДНЫХ БЕЛКОВдипломная работа (Магистр)
- Научные руководители: Муронец В.И., Курочкина Л.П.
- Автор: Лейси Евгения Викторовна
- Тип: Магистр
- Организация, в которой проходила защита: МГУ имени М.В. Ломоносова
- Год защиты: 2022
- Аннотация: Были получены очищенные препараты белков: бактериальный шаперонин GroEL и его ко-шаперонин GroES, однокольцевой вирусный шаперонин gp246 и двухкольцевой gp146, α-синуклеин дикого типа и мутант A53T. Изучено влияние исследуемых шаперонов на кинетику агрегации α-синуклеина зависит от ATP. Показано, что gp246, gp146 сокращают продолжительность лаг-фазы и тем самым ускоряют процесс агрегации α-синуклеина A53T в присутствии ATP. В то же время в отсутствии ATP данные шапероны напротив препятствуют амилоидизации. Бактериальная система GroE в присутствии ATP действует похожим образом. А именно, шаперонин способствует агрегации A53T и сокращает продолжительность лаг-фазы α-синуклеина дикого типа. Влияние gp246 и gp146 на морфологию образуемых агрегатов α-синуклеина A53T также зависит от ATP. Без добавления шаперонов, в наших условиях образовывались короткие фибриллы, которые могут слипаться между собой. В присутствии gp246 и ATP фибриллы длинные и скученные. При инкубации α-синуклеина gp246 без ATP мы наблюдали лишь скопления агрегатов. В присутствии gp146 без нуклеотида мы так же, как и в случае с gp246, наблюдаем скопления агрегатов, однако в случае с gp146 можно отметить образование малого количества длинных и тонких фибрилл. В присутствии gp146 и ATP образуются крупные амилоидные агрегаты. Было показано что gp246 не образует стабильный комплекс с мономерами α-синуклеина в выбранных в исследовании условиях. GroEL, по результатам иммуноферментного анализа, не взаимодействует с мономерной формой α-синуклеина, однако способен связываться с промежуточными продуктами агрегации. При этом ни GroEL, ни gp146 не способны разбирать предварительно сформированные фибриллы.
- Добавил в систему: Муронец Владимир Израилевич