Аннотация:Никотиновый ацетилхолиновый рецептор относится к классу лигандозависимых ионных каналов, встроенных в постсинаптическую мембрану нейронов, основной функцией которых является быстрая нейропередача [14]. Благодаря своей способности преобразовывать межклеточные сигналы, нАХР играет ключевую роль в развитии и возникновении ряда заболеваний центральной нервной системы, таких как шизофрения, эпилепсия, депрессия, никотиновая и алкогольная зависимости, болезнь Альцгеймера, паркинсонизм, мышечная дистрофия, аутизм. Изучение механизмов взаимодействия лигандозависимых ионных каналов со своими лигандами интересно не только как фундаментальная задача молекулярной биологии, но и с точки зрения разработки новых медицинских препаратов и тест-систем.
Lynx1 –нейромодулятор, регулирующий деятельность нАХР центральной нервной системы. Lynx1 обнаружен в нервных клетках мышей, обезьян, насекомых и человека [1-3, 5, 7]. Этот белок получил своё название благодаря гомологическому родству с суперсемейством Ly-6 белков [1]. Эксперименты, in vivo и in vitro показали, что отсутствие гена lynx1 приводит к уменьшению десенситизации и амплитуды нейронного тока и увеличению нейродегенерации организмов [2-3].
Ранее в лаборатории инженерии белка ИБХ РАН был разработан протокол по бактериальной продукции lynx1 человека методом прямой экспрессии, который, однако, не даёт высокого выхода целевого белка. Поэтому целью данной работы было создание альтернативных генно-инженерных конструкций для бактериальной продукции lynx1 методом слитной конструкции с белком тиоредоксином и методом секреции, разработка протоколов по выделению и очистке lynx1 для обоих методов, а также усовершенствование метода прямой экспрессии.