Аннотация:Выбранная методика выделения 20S и 26S протеасомы позволила получить протеолитические комплексы в активном и высокоочищенном состоянии. Отработана и оптимизирована методика выделения 11S регуляторной субчастицы из гомогената тканей. Определен субъединичный состав выделенного белка. Показано, что в полученном образце присутствуют 11S субчастицы, составленные из всех трех типов субъединиц (α, β и γ). Определены константы Михаэлиса 20S протеасомы из головного мозга мышей линии BALB/c по специфическим флуоресцентным субстратам Suc-LLVY-AMC, Ac-RLR-AMC, Z-LLE-AMC и константы Михаэлиса для комплекса протеасомы 20S c 11S регуляторным белком. Показано, что 11S субчастица практически не влияет на связывание специфических флуоресцентных пептидных субстратов 20S протеасомой, но значительно увеличивает скорость гидролиза по всем трем субстратам. Хантингтин, содержащий длинный полиглутаминовый фрагмент, ингибирует 26S протеасому in vitro, а 11S регулятор снимает этот ингибирующий эффект.