Аннотация:На сегодняшний день существует большое количество патогенных микроорганизмов, резистентных к антибиотикам. Поэтому поиск альтернативных путей лечения заболеваний, вызываемых ими, является очень важным. Литические ферменты бактериофагов могут рассматриваться в качестве потенциальной альтернативы антибиотикотерапии.
В данной работе рассматривается фермент, лизирующий клеточные стенки грамотрицательных клеток E. Coli. Строение клеточной стенки грамотрицательных бактерий очень сложное: имеется наружная мембрана, пептидогликановый слой и цитоплазматическая мембрана. Пептидогликан - основная мишень действия фаговых ферментов. Наличие наружной мембраны затрудняет доступ лизинов к разрываемым связям в пептидогликане, что является проблемой при лизисе клеток грамотрицательных бактерий.
Таким образом, цель данной работы заключалась в исследовании влияния эффекторов различной природы на активность лизоцима 394/1, лизирующего клетки E. сoli.
При исследовании влияния добавок (НПАВ, катионов металлов, ЭДТА, гликозидаз) на активность фермента лизин 394/1 показано, что происходит увеличение эффективности действия фермента.
Наилучшее влияние на активность фермента оказали Triton X-100, Myrj 52, Brij 96, Brij 99 (увеличение активности в 3-5 раз).
Положительный эффект на стабильность оказали Triton X-100 (увеличение стабильности в 5 раз), ДТТ (в 1,5 раза), ацетат кальция (в 2,5 раза).
В результате микробиологического теста была подтверждена эффективность использования лизина 394/1 для лизиса клеток E. Сoli, а также усиление его действия в присутствии Brij 96.