Транзиентная система экспрессии в растении: артефактные последствия метода, основанного на суперпродукции зеленого флуоресцентного белкадипломная работа (Специалист)
Аннотация:Целью данной работы является выявление биохимических последствий, возникающих при использовании метода ТЭ для суперпродукции зеленого флуоресцентного белка (GFP).
В ходе работы для достижения поставленной цели были решены три задачи:
Задача 1:
Создание экспериментальной система ТЭ, где суперэкспрессия GFP приводит к клеточной смерти.
В этой части работы проведен сравнительный анализ эффективности продукции GFP, обеспечиваемой векторами на основе генома крВТМ.
Задача 2:
Идентификация генов, реагирующих на суперпродукцию GFP.
В этой части работы для выявления генов, экспрессия которых изменяется в результате суперпродукции GFP, приводящей к клеточной смерти, был проведен сравнительный анализ транскриптома растений N. benthamina методом вычитающей гибридизации.
Задача 3: Изучение функции гена ПЖК («ген, продлевающий жизнь клетки»).
В ходе решения этой задачи получены результаты, подкрепляющую модель, согласно которой ПЖК и его мРНК синтезируется для сдерживания избыточного синтеза GFP и предотвращения исчерпания клеточных ресурсов.