Аннотация:В соматических клетках растений одним из наиболее ранних сигнальных событий, связанных с перцепцией перекиси, является активация кальциевых каналов [12]. При изучении динамики цитозольной концентрации кальция в субпротопластах из пыльцевых трубок также было выявлено быстрое увеличение [Ca2+]cyt в ответ на добавления перекиси (10 мкМ). Ингибитор Ca2+-каналов нифедипин полностью снимал этот эффект, демонстрируя, что вход кальция в цитозоль происходит через Ca2+-каналы плазмалеммы. Известно, что АФК-индуцированный вход Ca2+ является важным модулем в регуляторных сетях растительной клетки и является важным компонентом в ряде физиологических процессов: АБК-индуцируемое закрытие устьиц, апикальный рост корневого волоска, рост эпидермальных клеток корня в зоне элонгации [12]. Полученные данные позволяют говорить о наличии такого модуля в системе регуляции роста пыльцевой трубки.
Мы предположили, что обнаруженная динамика [Ca2+]cyt может быть тесно связана с изменениями мембранного потенциала, поскольку в пыльцевых трубках ранее были обнаружены потенциал-зависимые катионные каналы, опосредующие вход Ca2+ [13]. Для проверки этого предположения была исследована динамика мембранного потенциала при действии перекиси. С использованием двух различных красителей было обнаружено, что после добавления перекиси происходила гиперполяризация мембраны, сопровождающая вход Ca2+. Обнаруженные мембранные эффекты свидетельствуют о наличии на плазмалемме пыльцевой трубки мишеней для действия перекиси.
Чтобы проверить, не вызывает ли экзогенная перекись патологических изменений в состоянии субпротопластов, проводили измерение pH, как интегрального показателя физиологического состояния, и оценку жизнеспособности. Было показано, что даже при воздействии 100 μМ H2O2 pH не изменялся, а жизнеспособность сохранялась на уровне контроля. Это означает, что используемые концентрации являются физиологическими, а наблюдаемые эффекты свидетельствуют о возможном участии перекиси в передаче экзогенного сигнала.
Однако, для ответа на вопрос о конкретных мишенях для действия перекиси на плазмалемме необходимы дальнейшие исследования с использованием микроэлектродных методов. Кроме того, темой дальнейшего исследования является механизм H2O2-индуцируемой гиперполяризации плазмалеммы.