Аннотация: Транспортно-матричная РНК(тмРНК) впервые обнаружена в клетках E.coli более 20 лет назад, но ее функцию установили только в 1996 году. тмРНК содержит элементы мРНК и тРНК. Матричная часть тмРНК кодирует пептид, являющейся сигналом узнавания специфическими протеазами (taq-пептид). тРНК-подобная часть может быть аминоацилирована. В аминоацилированном состоянии тмРНК взаимодействует с рибосомой, в которой синтез белка блокирован деградированной мРНК, не содержащей сигнал терминации. тмРНК входит в такие заблокированные рибосомы, полипептидная цепь переносится на молекулу тмРНК, после трансляция продолжается по матричной части тмРНК, завершающейся стоп-кодоном, на котором рибосома может терминировать с помощью обычных клеточных механизмов. Синтезированный при участии тмРНК неполноценный белок несет taq-пептид, что приводит к его быстрому гидролизу специфическими протеазами. Таким образом, с помощью тмРНК клетка избавляется от потенциально опасных недосинтезированных белков и освобождает рибосомы для дальнейшего синтза. После открытия функции тмРНК, структура и функции этой молекулы изучается очень активно. Было показано, что тмРНК важна для роста клеток при условиях стресса, например, при повышенной температуре. Позднее оказалось, что тмРНК играет важную роль в жизнедеятельности клеток и при нормальных условиях, так она поддерживает рост различных фагов, необходима для вирулентности некоторых бактерий, участвует в регуляции некоторых оперонов. Несмотря на обширные исследования механизма функционирования тмРНК и открытие многих белковых факторов, принимающих участие в процессе транс-трансляции, центральный момент этого процесса - взаимодействие тмРНК с рибосомой непонятно, а именно, как тмРНК связывается с рибосомой при отсутствии кодон-антикодонового взаимодействия, как такая большая и высокоструктурированная молекула как тмРНК двигается через рибосому в процессе синтеза tag-пептида - эти вопросы остаются открытами. Целью данной работы является создание системы для выделения комплекса рибосом, остановившихся на мРНК, лишенной стоп-кодона, - субстратов тмРНК. С помощью таких комплексов можно изучать взаимодействие тмРНК с рибосомой in vitro методами химической модификации, фотоаффинного химического сшавания, а также методами криоэлектронной микроскопии и рентгеноструктурного анализа.