Функциональный анализ генов транспортной системы типа ABC-2, контролирующих устойчивость клеток Synechocystis sp. PCC 6803 к метилвиологену и его структурным аналогамдипломная работа (Специалист)
Аннотация:В данной работе с целью выяснения генетического контроля и молекулярных механизмов развития устойчивости к метилвиологену у цианобактерии Synechocystis были поставлены следующие задачи.
1. Методами молекулярно-генетического анализа идентифицировать ген, мутация в котором повышает устойчивость псевдоревертанта rII3 к метилвиологену.
2. С помощью подходов биоинформатики выявить предполагаемые функциональные партнеры идентифицированного гена slr1174, кодирующего белок, гомологичный мембранному домену транспортной системы типа ABC-2.
3. С помощью функционального анализа выяснить роль генов slr1174 и его потенциальных партнеров, slr0610 и slr1901, кодирующих мембранный и АТФазный домены транспортной системы типа ABC-2, в контроле устойчивости цианобактерий к метилвиологену и его структурным аналогам бензилвиологену и этилвиологену.
На основании полученных результатов сделаны следующие ВЫВОДЫ. 1. Впервые показано, что белки-экспортеры ABC-типа участвуют в обеспечении устойчивости клеток аэробных организмов к индуктору окислительного стресса метилвиологену.
2. Идентифицирован новый ген slr1174, контролирующий устойчивость цианобактерии Synechocystis к метилвиологену и его структурным аналогам. Этот ген кодирует предполагаемый пермеазный компонент транспортной системы типа ABC-2. Мутация, приводящая к замене аргинина на цистеин в положении 115 белка Slr1174, обуславливает повышение устойчивости клеток к метилвиологену.
3. С помощью биоинформатического анализа выявлены гены slr0610 и slr1901, функциональные партнеры гена slr1174, кодирующие предполагаемые пермеазный белок и АТФазу системы ABC-2. Анализ мутантов с инсерционной инактивацией этих генов показал, что белки Slr0610, Slr1901 и Slr1174 составляют единую трехкомпонентную систему удаления метилвиологена и его аналогов из клеток цианобактерий.