Аннотация:В настоящее время актуальной проблемой является диагностика заболеваний, связан-ных с нарушением нейромедиаторного обмена, которые делятся на две группы. К первой от-носятся нейродегенеративные заболевания, которые сопровождаются прогрессирующей гибе-лью нервных клеток. Вторая группа – нейроэндокринные заболевания, характеризующиеся органическим поражением или генетической дефектностью гипоталамуса. Примерами нейродегенеративных заболеваний являются болезнь Альцгеймера (БА) и болезнь Паркинсо-на (БП). В России на 2016 г. общая численность больных, страдающих болезнями Альцгейме-ра и Паркинсона, составляла около 1.8 млн и 300 тыс. человек, соответственно [1 – 3].
К нейроэндокринным заболеваниям относятся опухоли феохромоцитома, параган-глиома, карциноидные опухоли и нейробластома. Они относятся к числу редко встречаю-щихся онкологических заболеваний. Но их проблема их диагностики не менее важна, т.к. злокачественное новообразование часто диагностируется уже в ретроспективе, в период раз-вития метастатической или рецидивирующей стадии заболевания. В 2013 г. только в России было выявлено более 500 тыс. новых случаев злокачественного новообразования, что на 15 % больше по сравнению с 2003 г. [4].
Катехоламины являются маркерами нейромедиаторного обмена, то есть по изменению их содержания в биообразцах человека, в частности в клетках, можно диагностировать забо-левания, относящиеся к обеим группам. Нейродегенеративные нарушения характеризуются уменьшением содержания КА и их метаболитов в организме, нейроэндокринные – избыточ-ным синтезом КА. Определение КА для диагностики нейродегенеративных и нейроэндо-кринных заболеваний осложняется тем, что в организме здорового человека содержание КА очень мало (на уровне 1 нМ). Кроме того, КА быстро окисляются и метаболизируются в орга-низме, поэтому определения должно проводиться в течение 10 – 20 минут, а также метод определения должен обеспечивать стабильность состава пробы. Таким образом, актуален по-иск простых, экспрессных, доступных, селективных и чувствительных методик определения катехоламинов в различных клеточных структурах.
В настоящее время перспективным подходом для решения поставленных задач являет-ся использование флуоресцентных комплексов катехоламинов с ионами металлов (в частно-сти лантанидов (европий) и органическими лигандами (окситетрациклин), а также определе-ние маркеров нейромедиаторного обмена непосредственно в клеточных культурах в гелевых матрицах. Подобные методики позволяют добиваться чувствительности на уровне 1 пМ, что делает возможным их использование для диагностики заболеваний.
Целью работы стала разработка твердофазных флуоресцентных индикаторных систем и методик для определения катехоламинов в клеточных культурах.