Аннотация:В химическом анализе широко применяется метод иммунного анализа – мощный метод, отличающийся селективностью и чувствительностью и позволяющий определять следы аналитов в пищевых продуктах, биоматериалах и других важных для здоровья человека объектах. Однако он имеет ряд недостатков. Например, необходимость получения антител из живых организмов, невозможность определения высокомолекулярных и органикорастворимых соединений и др. В связи с этим внимание аналитиков обращено к искусственным антителам, получаемым методом молекулярного импринтинга (молекулярных отпечатков).
Молекулярный импринтинг (molecular imprinting) — метод получения «молекулярных отпечатков», основанный на полимеризации функциональных мономеров в присутствии специально введенных целевых молекул-темплатов (template — шаблон).
Молекулярно импринтированный материал создают так: в смесь мономеров добавляют вещество, для которого хотят создать «формочку», затем вызывают полимеризацию. Вокруг молекул импринтируемого вещества образуется полимер, затем это вещество вымывают или уничтожают, а в полимере остаются его отпечатки, комплементарные нужной молекуле и способные удерживать ее.
Цели работы – изучение возможности использования молекулярного импринтинга энрофлоксацина как альтернативы ФПИА.
Задачи работы – определение энрофлоксацина методом ФПИА в сточных водах, осуществление молекулярного импринтинга энрофлоксацина в различные матрицы и измерение поляризации флуоресценции полученных сорбентов.
Выводы
1. Выбраны концентрационные условия определения энрофлоксацина методом флуоресцентного поляризационного иммуноанализа (ФПИА). Проведено определение энрофлоксацина методом ФПИА в 15 образцах сточных вод предприятий на уровне 0.1–1 мг/л.
2. Проведен молекулярный импринтинг энрофлоксацина в матрицу кремнезема, содержащую синие или оранжевые углеродные точки (УТ), по известной методике. Десорбция темплата уксусной кислотой, этанолом и водой привела к тушению флуоресценции УТ, вероятно, вследствие гидролиза азометинов. Для восстановления флуоресценции предложена обработка УТ моноэтиламином или диметил-п-фенилендиамином в фосфатном буфере. При повторном связывании темплата для МИП-сорбента наблюдали в 3 раза более интенсивную, чем для НИП, флуоресценцию образцов с оранжевыми УТ.
3. Обнаружено, что МИП и НИП сорбенты имеют различные спектры поляризации флуоресценции в диапазоне длин волн 450-650 нм; максимальное различие спектров наблюдали при 490, 570 и 620 нм.