Функциональный анализ 5'-нетранслируемой области мРНК эукариотического фактора инициации трансляции eIF2D - курсовая работа | ИСТИНА – Интеллектуальная Система Тематического Исследования НАукометрических данных

Научный руководитель: Дмитриев С.Е.
Автор: Синицын Павел Геннадьевич
Тип: Специалист
Организация, в которой проходила защита: МГУ имени М.В. Ломоносова
Кафедра: Факультет биоинженерии и биоинформатики
Год защиты: 2012
Курс: 3
Аннотация: Синтез белковой цепи у эукариот является сложным многостадийным процессом, требующим согласованной работы значительного числа клеточных компонентов. В большинстве случаев его регуляция осуществляется на уровне инициации, и отчасти по этой причине данный этап трансляции является объектом наиболее пристального внимания исследователей. На сегодняшний день известны десятки белков, принимающих непосредственное участие в инициации трансляции, однако функции и механизмы регуляции активности большинства из них изучены недостаточно. В нашей лаборатории недавно был открыт новый эукариотический инициаторный фактор, названный eIF2D. Его функциональные свойства были подробно изучены в системе сборки трансляционных комплексов из очищенных компонентов – однако функция eIF2D в живой клетке до сих пор остаётся загадкой. Наше внимание привлекла необычная организация 5’-нетранслируемой области мРНК, кодирующей eIF2D человека. Её нуклеотидная последовательность характеризуется повышенной консервативностью среди млекопитающих, необычно высоким процентом GC-нуклеотидов, предполагает наличие сложной вторичной структуры и имеет uORF (открытую рамку считывания, расположенную выше основной рамки) – при этом нуклеотидный контекст стартового кодона, открывающего uORF, предполагает очень эффективное узнавание его сканирующей рибосомой, в то время как нуклеотидный контекст основного AUG, напротив, можно охарактеризовать как «слабый». Целью нашего исследования было изучить влияние 5’-НТО мРНК eIF2D человека на трансляцию репортёра в нормальных условиях и в условиях клеточных стрессов. Мы ставили перед собой следующие экспериментальные задачи: получить молекулярно- генетические конструкции, содержащие ген люциферазы светлячка под контролем 5’- НТО eIF2D человека; сравнить эффективность трансляции соответствующей мРНК с таковой для классического кеп-зависимого лидера мРНК β-глобина в бесклеточной системе трансляции (in vitro) и в культивируемых клетках человека (in vivo); определить зависимость эффективности трансляции данной мРНК от 5’-кепа; изучить влияние белка eIF2D на эффективность трансляции такой мРНК; провести скрининг веществ, вызывающих клеточные стрессы различного типа, на предмет их избирательного воздействия на эффективность трансляции этой мРНК.
Добавил в систему: Дмитриев Сергей Евгеньевич

	ИСТИНА	Войти в систему Регистрация
	ИСТИНА ИНХС РАН
	Главная Поиск Статистика О проекте Помощь

ИСТИНА

ИСТИНА ИНХС РАН

Функциональный анализ 5'-нетранслируемой области мРНК эукариотического фактора инициации трансляции eIF2Dкурсовая работа (Специалист)

Прикрепленные файлы