|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ИНХС РАН |
||
«Изучение ингибирующего эффекта ионов Са2+ на митохондриальную цитохромоксидазу в условиях, приближенных к физиологическим». курсовая работа (Специалист)
- Научные руководители: Выгодина Т.В., Константинов А.А.
- Автор: Мухалева Е.В.,
- Тип: Специалист
- Организация, в которой проходила защита: МГУ имени М.В. Ломоносова
- Кафедра: Факультет биоинженерии и биоинформатики
- Год защиты: 2015
- Курс: 2
- Аннотация: Субъединица I цитохромом с оксидазы (ЦО) митохондрий и многих бактерий содержит специальный Центр Связывания Катионов (ЦСК), локализованный вблизи гема а и обращенный во внешнюю водную фазу. В бактериальной ЦО там находится прочно связанный Ca2+, а у ЦО млекопитающих сайт обратимо связывает Ca2+ или Na+ . Присоединение Ca2+ вызывает сдвиг спектра гема а , что позволило ранее определить характеристики связывания Ca2+ с ЦСК. Na+ практически не меняет спектральные свойства гема а , но конкурирует с Ca2+ , снижая кажущееся сродство последнего к ЦСК . Физиологическая значимость явления оставалась неясной до последнего времени, когда наша группа обнаружила, что добавленный снаружи Ca2+ может в 2-3 раза ингибировать активность ЦО в составе митохондрий или выделенной из сердца быка с Ki ~1 M, близкой к Kd связывания Ca2+ с ЦО . Известно, что находящиеся в цитоплазме ионы металлов, например Na+, влияют на связывание Ca2+ с ЦО, а значит могут модулировать ингибирующий эффект Ca2+ на дыхание. В связи с этим мы изучили ингибирование дыхания Ca2+ в среде, близкой по солевому составу к цитоплазме, содержащей 150 мM K+, 12 мM Na+ и 1 мM Mg2+. Содержание свободного Ca2+ контролировалось с помощью Са-НТА(нитрилтриацетат) буфера. Максимальное ингибирование в данной среде было примерно двукратным, как и в предыдущих опытах, однако, кажушаяся Ki увеличилась с ~1 µM до ~20-26 µM в соответствии с тем, как Na+ влиял на связывание Ca2+ по данным спектральных измерений. Следовательно, покоящаяся клетка защищена Na+ от ингибирующего действия ионов Ca2+ , которое, однако, может вступить в игру на пике выброса Ca2+ эндоплазматическим ретикулумом (ЭР) в приграничное с мембранами митохондрий пространство в ответ на разные стимулы, например, во время Са спайков в сокращающемся сердце.
- Добавил в систему: Выгодина Татьяна Владимировна