ИСТИНА

В данной работе был разработан метод выделения теломеразы дрожжей с помощью аффинной хроматографии с использованием РНК-аптамерной вставки в TLC1 РНК. При этом использовалась вставка в TLC1 РНК, являющаяся аптамером к стрептавидину. Эта вставка была введена в два различных района в TLC1 РНК. В работе была создана система для тестирования функциональности модифицированной теломеразной РНК на основе метода замены плазмид в дрожжах, подходящая для изучения возможности димеризации теломеразы. Показано, что теломераза, содержащая TLC1 РНК с одной из вставок, функциональна in vivo и может быть выделена in vitro. В препарате теломеразы, полученной из штамма, экспрессирующего две различающиеся молекулы TLC1 РНК (с аптамерной вставкой и без нее), обнаружен активный фермент, содержащий только TLC1 РНК со вставкой. Таким образом, в работе показано, что теломераза дрожжей активна in vitro в мономерной форме. В работе впервые показана возможность вхождения биотинилированного компонента в состав теломеразного комплекса дрожжей. Теломераза, содержащая биотинилированный белок, активна in vitro. Она составляет менее половины общего количества активной теломеразы, выделенной из клеток, а именно, легкую фракцию теломеразных комплексов.