ИСТИНА

Диссертационная работа Е.А. Климова является завершенным фундаментальным исследованием в области генетики человека, посвященным картированию и структурно-функциональному анализу генов и других картированных последовательностей генома. Работа была инициирована в конце 20-го века, когда активно велось секвенирование генома человека, создание новых систем ДНК-маркеров генома человека, построение генетических карт различного типа и их совмещение. Картирование генома человека имело особую актуальность, т.к. это необходимый этап для правильной сборки геномных контигов и точной локализации генов на различных типах карт генома человека. Работы по структурно-функциональному анализу генов и функционально-значимых последовательностей генома человека актуальны и по сей день, поскольку полная расшифровка структурных особенностей и принципов функционирования генома очень далека от завершения. На основании данных по локализации NotI-STS-маркеров методом радиационного картирования построена физическая NotI-карта короткого плеча хромосомы 3. Показано, что NotI-STS следует рассматривать как универсальные маркеры генов. Применение данного типа маркеров эффективно при картировании еще не изученных геномов, а построенные с их помощью карты позволят не только с высокой вероятностью идентифицировать гены, но и проводить оценку корректности совмещения геномных контигов при секвенировании генома. Е.А. Климовым впервые показано, что в случае интеграции транскрибируемая ДНК вируса папилломы локализована в областях генома человека, насыщенных генами с высоким уровнем транскрипционной активности. Автором впервые определено, что терминация транскрипции интегрированной ДНК вируса осуществляется за счет близлежащих сигналов полиаденилирования клетки-хозяина. В рамках диссертационного исследования Е.А. Климовым показано изменение экспрессии генов RHOA, SEMA3B, RARB, GPX1, DAG1, NBEAL2, CKAP2, W91914 и H51703 в опухолях различной локализации и прилегающей гистологической нормы. Продемонстрировано, что изменение транскрипционной активности генов в опухолях по отношению к норме является надежным тестом для предсказания роли генов в процессах развития опухоли. Использование данного подхода позволяет быстро отбирать гены, участвующие в развитии заболевания, не только при изучении молекулярных основ канцерогенеза, но и при других системных заболеваниях человека. Е.А. Климовым картированы и впервые охарактеризованы гены ABLIM2, WASF4, NBEAL2 и CKAP2. Автором показано, что гены ABLIM2 и NBEAL2 консервативны по своей структуре и функции у млекопитающих. Ген WASF4 выявлен только у человека и приматов, что свидетельствует о недавнем его появлении в геномах млекопитающих. С непосредственным участием автора создана тест-система для одновременного определения мутаций CCR5del32 и CCR5m303 в гене CCR5 человека, которая является эффективным инструментом для определения генетической устойчивости к заражению М-тропным вариантом ВИЧ. Экспериментальная часть работы выполнена на современном методическом уровне. Достоверность и научная значимость полученных автором данных не вызывает сомнений, выводы объективны и научно обоснованы. Содержание работы отражено в полной мере в 79 публикациях, включая 17 статей в журналах, включенных в перечень научных журналов и изданий, рекомендованных ВАК Минобрнауки России, 1 патент и 61 публикацию в других журналах, сборниках и материалах конференций и симпозиумов. Диссертация DOI: 10.13140/RG.2.1.1380.1842 ; Автореферат DOI: 10.13140/RG.2.1.1601.3682